Resumos Aprovados

Para utilização de microesferas (MPS) de ácido polilático co-glicólico (PLGA) incorporando sinvastatina (SIN) em estratégias de reparação óssea in vivo é necessário um método de esterilização eficaz que permita a manutenção das características do biomaterial. Objetivando avaliar as interferências da esterilização por óxido de etileno (OE) nas características físico-químicas e biológicas do biomaterial, as MPS foram sintetizadas pelo método de emulsão de óleo em água (O/A) e evaporação do solvente, com e sem a adição de SIN na proporção de 2% (PLGA+2%SIN) entre fármaco e polímero (m/m). Parte das amostras foi submetida a esterilização por OE a 55 ^oC durante 180 min e a outra parte permaneceu sem esterilização. A morfologia das MPS foi analisada por microscopia eletrônica de varredura (MEV) e seu tamanho médio foi mensurado por ImageJ. A caracterização química foi realizada por espectroscopia por energia dispersiva (EDS) e por infravermelho com transformada de Fourier (FTIR). A fase do material foi determinada por difração de raio X (DRX) e o comportamento biológico foi avaliado pelo teste colorimétrico MTT. As imagens da MEV revelaram MPS com formato esférico e livre de porosidades, o tamanho e a forma não foram alterados pela incorporação da SIN ou pela esterilização. A análise da composição química demonstrou aumento do elemento químico carbono e variação na transmitância associado a possível presença de resíduo. O FTIR certificou a incorporação da SIN ao PLGA.

Avaliou-se o efeito da fotobiomodulação com laserterapia de baixa intensidade (LBI) combinado ou não à nimesulida 100mg oral sobre desfechos relacionados ao estresse oxidativo em cirurgias de terceiros molares inferiores (3MI). Quarenta voluntários participaram de um ensaio clínico, boca-dividida, randomizado, bifatorial, triplo cego, controlado, que se submeteram à remoção de 3MI. Os grupos de estudo preemptivos (1 hora antes da cirurgia) foram: LBI+nimesulida (LN), LBI+placebo (LP), nimesulida+placebo (NP), placebo+placebo (PP). Durante a cirurgia foram removidas amostras de tecido gengival na região adjacente ao 3MI nos tempos zero (T0) e 30 minutos (T30), sendo avaliados: mieloperoxidase (MPO), malonaldeído (MDA), glutationa (GSH) e proteínas totais (PT). Os grupos PP (p=0,841), LP (p=0,674) e LN (p=0,450) não demonstraram variação significante na concentração de GSH de T0 para T30. O grupo LP demonstrou aumento significativo desse marcador no período avaliado (p=0,009). Níveis de MPO aumentaram significantemente de T0 para T30 nos grupos PP (p<0,001), LP (p<0,001) e LN (p<0,001). Níveis de MDA aumentaram significantemente de T0 para T30 nos grupos PP (p<0,001) e LP (p=0,007). A dosagem de PT aumentou significantemente de T0 para T30 nos grupos PP (p=0,040), LP (p<0,001) e LN (p<0,001).

O gene SP7 é um dos principais marcadores osteogênicos. Aqui, investigamos a maquinaria epigenética envolvida na regulação (pós)transcricional deste gene em células mesenquimais do ligamento periodontal humano (PDLCs). A acessibilidade da cromatina (ATAC-seq), metilação do genoma (Metiloma) e sequenciamento de RNA (RNA-seq) foram investigados em PDLCs com baixa (l-) e alta (h-) capacidade de deposição mineral, in vitro, em meios de cultura padrão (DMEM) e osteogênico (OM), por 10 dias. Os dados foram processados nos programas HOMER, Genome Studio e edgeR, e os metadados analisados com ferramentas de bioinformática on-line e ambiente R. Nas análises genômicas, as l-PDLCs apresentaram cromatina mais acessível em relação às h-PDLCs, tanto em DMEM quanto em OM. As análises gene-específicas demonstraram expressão diminuída do SP7 nas l-PDLCs (x h-PDLCs), sem diferença significativa no padrão de metilação do DNA. O RNA longo não-codificante (lncRNA) MIR31HG e os microRNAs MIRs 3151, 3192, 4269 e 601, preditos como repressores do SP7, apresentaram expressão aumentada nas l-PDLCs comparadas às h-PDLCs (MIRs 4269 e 601 em DMEM, MIRs 3151 e 3192 em OM e MIR31HG em ambos). Os lncRNAs LINC01622 e LINC01711, preditos como RNAs endógenos concorrentes (ceRNAs) dos MIRs 4269 e 3151, respectivamente, apresentaram correlações de expressão negativa com seus miRNAs alvos, indicando ação promotora indireta na regulação pós-transcricional do SP7.

A proteína da matrix extracelular agrin está envolvida em diversos processos biológicos e seu silenciamento inibe a diferenciação osteoblástica. O objetivo desse estudo foi investigar o efeito da superexpressão de agrin na diferenciação osteoblástica de células-tronco mesenquimais derivadas da medula óssea imortalizadas (iMSCs). A superexpressão de agrin foi realizada a partir da técnica de edição gênica CRISPR-Cas9. As iMSCs foram transduzidas com vetor Cas9 (iMSCs-VPR, controle) e então com RNA guia para superexpressar agrin (iMSCs-VPR^agrin+). A superexpressão foi confirmada por PCR em tempo real e imunofluorescência. O efeito da superexpressão na diferenciação osteoblástica foi avaliado pela expressão gênica de marcadores ósseos aos 5, 7 e 10 dias, atividade de fosfatase alcalina (ALP) in situ aos 7 e 10 dias, e formação de matriz extracelular mineralizada aos 21 dias. Os dados foram comparados por teste-t ou ANOVA (p≤0,05). A superexpressão de agrin foi confirmada pelo aumento de 50% na sua expressão, bem como maior marcação proteica (p=0,003 para ambos). A superexpressão de agrin aumentou a expressão dos genes Sp7, Alp, Bglap e Spp1 (p=0,004 para todos), a atividade de ALP aos 7 (p=0,009) e 10 (p=0,007) dias e a formação de matrix extracelular mineralizada (p=0,001).

Este estudo objetivou examinar indivíduos submetidos à bichectomia, utilizando a análise eletromiográfica (EMG) dos músculos masseteres e temporais em algumas tarefas mandibulares, antes, 1 mês e 2 meses de pós-operatório. Participaram 10 indivíduos saudáveis, ​​com oclusão normal e sem desordem temporomandibular. Este estudo foi aprovado pelo Comitê de Ética da Faculdade de Odontologia da Universidade de São Paulo (processo número 10589419.0.0000.5419). A atividade EMG incluiu análises dos músculos mastigatórios durante as tarefas mandibulares de repouso, lateralidade direita e esquerda, protrusão e apertamento dental em contração voluntária máxima por meio do eletromiógrafo Delsys Trigno TM wireless. Os dados foram tabulados e submetidos à estatística utilizando o teste de medidas repetidas realizado ao longo do tempo (p < 0,05), utilizando o software Statistical Package for the Social Sciences, versão 22.0 (SPSS Inc, Chicago, IL). Foram observadas diferenças significantes para o músculo temporal direito no repouso entre os períodos analisados (p = 0,003). Houve diminuição regular da atividade EMG em quase 100% dos músculos durante as tarefas mandibulares no primeiro mês de pós-operatório. Após 2 meses da bichectomia, ocorreu aumento da atividade EMG em quase todos os músculos, atingindo valores próximos aos valores anteriores à cirurgia.

A proteína agrin atua na diferenciação de osteoblastos, o que sugere seu envolvimento na regulação da atividade dos osteócitos, uma vez que ambos derivam da mesma linhagem osteoprogenitora. Assim, nosso objetivo foi avaliar a expressão de agrin e seus receptores durante a diferenciação osteocítica de células da linhagem Ocy-454. Para isso, as células foram expandidas a 33^oC, plaqueadas, e após 72 horas, mantidas a 37^oC para induzir a diferenciação osteocítica. A expressão gênica dos marcadores de osteócitos Sost e Rankl, bem como de Agrin e seus receptores Dag1 e Lrp4 foi avaliada no momento do plaqueamento e aos 7, 10, 14 e 17 dias por PCR em tempo real. Os dados foram analisados por ANOVA one-way (p≤0,05). A expressão de Sost aumentou continuamente a partir do dia 10, com pico aos 17 dias (p=0,001). A expressão de Rankl diminuiu até o dia 7 (p=0,001) e manteve-se constante até os 17 dias. A expressão de Agrin aumentou continuamente, atingindo o pico de expressão aos 10 dias (p=0,001), e então, decaiu continuamente até os 17 dias (7 = 17; p=1,000). A expressão de Dag1 diminuiu até o dia 7 (p=0,001), manteve-se constante aos 10 dias (p=1,000), diminuindo aos 14 dias (p=0,001) e mantendo-se constante até os 17 dias (p=0,404). A expressão de Lrp4 aumentou até o dia 7 dias (p=0,001), diminuiu continuamente até os 14 dias e manteve-se constante até os 17 dias (14 = 17, p=0,999).

Este estudo avaliou a influência da experiência do cirurgião na acurácia do posicionamento de implantes imediatos instalados na região anterior da maxila por meio de cirurgia guiada ou convencional. Dez cirurgiões inexperientes e 10 cirurgiões experientes instalaram em modelos odontológico, um implante de forma guiada e convencional na região do dente 12 e 22, distribuídos aleatoriamente. A amostra foi composta por 4 grupos: experiente e guiado (EG), experiente e convencional (EC), inexperiente e guiado (IG) e inexperiente e convencional (IC) com 10 casos em cada grupo, totalizando 40 implantes. Foram impressos 20 modelos obtidos a partir do escaneamento de um manequim de treinamento padronizado (MOM). Os modelos foram escaneados e tomografados e feito o planejamento cirúrgico utilizando o software coDiagnostiX®. Após a instalação dos implantes foram obtidas novas tomografias dos modelos e a acurácia do posicionamento foi comparada ao planejamento inicial por meio da sobreposição das imagens nos sentidos global, e linear, e os dados tabulados e submetidos a analise estatística. Os maiores desvios foram no posicionamento tridimensional apical para os cirurgiões experientes de forma convencional. Os menores desvios foram observados na plataforma no sentido mésio distal e vestíbulo palatino, em ambos os cirurgiões com cirurgia guiada.

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