PN0017 - Painel Aspirante
Área: 3 - Cariologia / Tecido Mineralizado

Controle do desgaste dental erosivo com uma película híbrida experimental carregada com agentes anti-erosivos
Sakae LO, Bezerra SJC, Viana IEL, Aoki IV, Hara AT, Scaramucci T
Dentística - UNIVERSIDADE DE SÃO PAULO - SÃO PAULO
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

O objetivo desse trabalho foi avaliar o efeito de uma película híbrida carregada com agentes anti-erosivos, encapsulados ou não, no controle do desgaste dental erosivo em esmalte e dentina. Espécimes de esmalte e dentina bovinos previamente erodidos (n=10/substrato) foram alocados nos seguintes grupos experimentais: 1. Controle negativo (C - água destilada); 2. Controle positivo (FP - Flúor Protector 1000 ppm F-); 3. Película híbrida (H); 4. H + NaF (4530 ppm F-); 5. H + NaF encapsulado (0,05g de nano cápsulas/ml); 6. H + NaF + SnCl2 (H+F+Sn - 4530 ppm F- + 6260 ppm Sn2+); 7. H + NaF + SnCl2 encapsulado (0,05g de cada nanocápsulas/ml). Os espécimes foram então submetidos a 5 dias de ciclagem erosiva-abrasiva. O desafio erosivo (ácido cítrico 0,3%, 5 min) foi realizado 4x/dia, seguido por exposição à saliva artificial (60 min). Trinta minutos após o primeiro e último desafios erosivos do dia, os espécimes foram escovados por 15 s em uma máquina de escovação, com uma suspensão de dentifrício fluoretado/água destilada, totalizando 2 min de exposição à suspensão. A perda de superfície (PS) dos espécimes (em µm) foi avaliada em um perfilômetro ótico, ao final da ciclagem. Os dados foram submetidos aos testes de Kruskal-Wallis e Dunn (α=0.05). Para ambos os substratos, nenhum grupo apresentou PS significativamente menor que o controle negativo (p>0,05).
Nenhum material foi eficaz no controle do desgaste dental erosivo em esmalte e dentina. O carregamento da película híbrida com agentes anti-erosivos não promoveu melhora no seu potencial protetor contra erosão-abrasão.
(Apoio: FAPs - Fapesp  N° 2017/14691-6  |  FAPs - Fapesp  N° 2017/13855-5)

---

PN0018 - Painel Aspirante
Área: 3 - Cariologia / Tecido Mineralizado

Efeito de uma película híbrida aditivada com NaF e/ou SnCl₂, encapsulados ou não, no controle da progressão da erosão dental
Viana IEL, Bezerra SJC, Aoki IV, Hara AT, Scaramucci T
Dentística - UNIVERSIDADE DE SÃO PAULO - SÃO PAULO
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

Formular uma película híbrida e modificá-la por meio da incorporação de flúor e/ou estanho, encapsulados ou não, testando seu efeito no controle da progressão da erosão dental. Fragmentos de esmalte e dentina bovinos (n=10/substrato) foram previamente erodidos e submetidos aos tratamentos: C: Controle negativo (água destilada); FP: Controle positivo (Flúor Protector 1000 ppm F^-); H: Película híbrida; H+F: Película híbrida + NaF (4530 ppm F^-); H+FE: Película híbrida + NaF encapsulado (0,05g nanocápsulas/mL); H+F+Sn: Película híbrida + NaF + SnCl₂ (6260 ppm Sn²⁺); H+F+SnE: Película híbrida + NaF + SnCl₂ encapsulado (0,05g de cada nanocápsula/mL). Foi realizada uma ciclagem erosiva de 5 dias (ácido cítrico 0,3% por 5 min e saliva artificial por 60 min, 4x/dia). Após a ciclagem, a perda superficial (PS) dos espécimes foi avaliada em um perfilômetro óptico (em µm). Os dados foram submetidos aos testes de Kruskal-Wallis e Dunn (α=0,05). Para o esmalte, os grupos H e o FP apresentaram significativamente menor PS (p<0,05), sem diferença entre eles. Os outros grupos não diferenciaram significativamente do C (p>0,05). Para dentina, FP e os grupos com as películas híbridas apresentaram significativamente menor PS do que o C (p<0,05), com exceção dos grupos H+FE e H+F+Sn, os quais não diferenciaram entre si (p>0,05).
A película híbrida sem aditivos foi capaz de se aderir aos substratos dentários e protegê-los contra erosão. Em esmalte os aditivos não foram capazes de aumentar o efeito protetor da película híbrida. Para dentina, a incorporação de flúor promoveu efeito protetor.
(Apoio: FAPs - FAPESP  N° 2017/13855-5  |  FAPs - FAPESP  N° 2019/00549-9  |  FAPs - FAPESP  N° 2017/14691-6)

---

PN0019 - Painel Aspirante
Área: 3 - Controle de infecção / Microbiologia / Imunologia

Ácido cafeico contra Streptococcus mutans: efeito antimicrobiano e imunomodulador em macrófagos
Lamarque GCC, Sorgi CA, Nelson-Filho P, Faccioli LH, Paula-Silva FWG
Clínica Infantil - UNIVERSIDADE DE SÃO PAULO - RIBEIRÃO PRETO
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

Streptococcus mutans são os micro-organismos cariogênicos alvo da maioria dos agentes antimicobrianos. Tendo em vista que esses agentes podem apresentar efeitos colaterais, há necessidade de buscar por materiais que sejam compatíveis com os tecidos. O objetivo deste estudo foi investigar os efeitos antimicrobiano e anti-inflamatório do ácido cafeico na resposta de macrófagos contra S. mutans. S. mutans (10⁸ CFU/ mL) foram incubados com ácido cafeico para determinar a concentração inibitória média (IC50) e macrófagos foram incubados com ácido cafeico para determinar a viabilidade e citotoxicidade em contato o produto. Os efeitos anti-inflamatórios foram mensurados pelo acúmulo de óxido nítrico, produção do fator de necrose tumoral-α (TNF-α) e da prostaglandina E₂ (PGE₂). A fosforilação de NF-kB e a sobrevivência de S. mutans em macrófagos infectados por S. mutans também foi investigada. Verificamos que o ácido cafeico apresentou atividade antimicrobiana contra S. mutans (IC50 = 2,938 ± 0,1225 mM), sem efeito citotóxico. O ácido cafeico apresentou atividade imunomoduladora, inibindo a produção de nitrito, TNF-α e PGE₂ possivelmente pela via NF-kB.
Esse estudo mostra que o ácido cafeico apresenta efeito antimicrobiano contra S. mutans e potencial anti-inflamatório e imunomodulador em macrófagos, indicando que novos estudos podem ser realizados para avaliar a sua eficácia in vivo e os efeitos do uso a longo prazo.
(Apoio: CNPq  N° 140186/2020-4)

---

PN0020 - Painel Aspirante
Área: 3 - Cariologia / Tecido Mineralizado

Efeito da cistatina derivada da cana-de-açúcar na viabilidade do biofilme microcosmo para proteção contra cárie dentária
Araujo TT, Camiloti GD, Souza BM, Dionizio A, Carvalho TS, Magalhães AC, Henrique Silva F, Buzalaf MAR
Ciências Biológicas - UNIVERSIDADE DE SÃO PAULO - BAURU
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

Este estudo avaliou o efeito da da cistatina derivada da cana-de-açúcar (CaneCPI-5) na viabilidade do biofilme de microcosmo e na prevenção da desmineralização do esmalte. O biofilme microcosmo foi formado in vitro sobre espécimes de esmalte bovino (4X4mm; n=45) a partir de um pool de saliva humana e saliva McBain nas primeiras 8h de cultivo. A partir das primeiras 8h, os espécimes foram expostos apenas à saliva McBain contendo sacarose a 0,2% e, uma vez ao dia, foram tratados com as soluções por 60 s, durante 5 dias consecutivos. As soluções avaliadas foram: PBS (controle negativo), clorexidina 0,12% (CHX; controle positivo) e 3 concentrações de CaneCPI-5 (0,05; 0,1 e 0,5 mg/mL). A viabilidade do biofilme foi determinada pelo método de resazurina e a desmineralização do esmalte foi quantificada por microrradiografia transversal. Os dados foram analisados por ANOVA/Tukey (p<0,05). Todas as soluções contendo CaneCPI-5 reduziram significativamente a viabilidade do biofilme em comparação ao PBS, com melhor efeito para a CaneCPI-5 0,5 mg/mL, que apresentou, entretanto, resultados inferiores à CHX. Todas as concentrações de CaneCPI-5 reduziram significativamente a perda mineral e a profundidade da lesão em relação ao PBS, sendo, entretanto, inferiores à CHX.
Portanto, a CaneCPI-5 foi capaz de reduzir a viabilidade do biofilme e o seu potencial cariogênico.
(Apoio: FAPESP  N° 2019/08032-5)

---

PN0022 - Painel Aspirante
Área: 3 - Controle de infecção / Microbiologia / Imunologia

Os profissionais de saúde são imunizados após receber a vacinação contra hepatite B?
Santos MR, Geus JL, Koch LFA, Kintopp C, Baratto SSP, Spada PCP, Wambier LM, Sebastiani AM
UNIVERSIDADE POSITIVO
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

A infecção pelo vírus da hepatite B (HBV) está associada a consequências irreversíveis à saúde. Profissionais da saúde apresentam maior risco a esta infecção. Assim, a imunização é fundamental para garantir a proteção destes indivíduos. Além disso, o risco de contaminação cruzada pode ser reduzido por imunização. Esse trabalho teve como objetivo realizar uma revisão sistemática com metanálise para avaliar se os profissionais de saúde são imunizados após receber a vacinação contra o vírus da hepatite Bna, de acordo com as diretrizes recomendadas pela Organização Mundial de Saúde. A revisão sistemática foi registrada no banco de dados PROSPERO. Uma busca sistematizada foi realizada em diferentes bases e na literatura cinzenta. A Escala Modificada de EPHPP foi utilizada para avaliar o risco de viés dos estudos e o GRADE para a qualidade da evidência. Um total de 1865 artigos foram identificados após a remoção das duplicatas. Destes, 790 estudos permaneceram após a triagem dos títulos e resumos. Por fim, restaram dez estudos após a leitura do texto completo para análise qualitativa, os quais foram utilizados na meta-análise. Foi encontrada diferença significativa no protocolo da vacina para profissionais de saúde imunizados contra hepatite B, em comparação com aqueles não imunizados. A razão de risco foi de 7,37 (intervalo de confiança de 95% [IC] = 3,92 a 13,83; p <0,00001).
Este estudo mostrou que o protocolo da vacina é eficaz na imunização de profissionais de saúde contra a hepatite B. PALAVRAS-CHAVE: Vacinas contra Hepatite B ; Pessoal de Saúde; Revisão Sistemática.

---

PN0023 - Painel Aspirante
Área: 3 - Controle de infecção / Microbiologia / Imunologia

Avaliação microbiológica em biofilme multiespecie da hipericina-glucamina e ftalocianina-glucamina na terapia fotodinâmica
Sánchez-Puetate JC, Carvalho GG, Maquera-Huacho PM, Spolidorio DMP, Perussi JR, Ribeiro AO, Marcantonio RAC
Diagnostico e Cirurgia - UNIVERSIDADE ESTADUAL PAULISTA - ARARAQUARA
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos da terapia fotodinâmica antimicrobiana (aPDT), mediada por dois fotossensibilizadores (FS): Hipericina-glucamina (Hy-g) e Ftalocianina-glucamina (Ft-g) num modelo de biofilme multiespécie de Porphyromonas gingivalis (Pg), Aggregatibacter actynomicetemcomitans (Aa), Fusobacterium Nucleatum (Fn) e Streptococcus oralis (So). Foram obtidos biofilmes cultivados em placas que foram mantidas a 37^oC, em câmera de anaerobiose e o meio renovado a cada 24 horas. No grupo aPDT-Ft-g o biofilme foi irradiado com luz vermelha de 660 nm (39,65 J/cm²) (aPDT 1) e no grupo aPDT-Hy-g as placas foram irradiadas por luz âmbar de 590 nm (39,30 J/cm²) (aPDT 2). Os tratamentos foram conduzidos independentes e em triplicata (n=9). Após aplicação dos tratamentos, foi analisada a viabilidade dos micro-organismos com a técnica combinada de PCR em tempo real (qPCR) com o Propidium Monoazide (PMA). Os dados foram submetidos a análise estatística (p<0,05) obtendo diferenças estatisticamente significativas na viabilidade (redução entre 0,83 e 2,03 Geq/ml) para Pg, Fn e Aa com o grupo aPDT 1.
A aPDT mediada pelos fotossensibilizadores testados apresentou reduções estatisticamente significativas para o grupo aPDT 1, mesmo assim, ainda é limitada a ação destes contra micro-organismos anaeróbios em forma de biofilmes.
(Apoio: FAPESP  N° 2016/00275-8)

---

PN0024 - Painel Aspirante
Área: 3 - Fisiologia / Bioquimica / Farmacologia

Análise do efeito dose resposta da administração cumulativa de montelucaste sobre marcadores ósseos plasmáticos em camundongos
Parra da Silva RB, Carmo-Ribeiro KHA, Biguetti CC, Chaves-Neto AH, Matsumoto MA
Cirurgia e Clínica Integrada - UNIVERSIDADE ESTADUAL PAULISTA - ARAÇATUBA
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

Leucotrienos (LTs) possuem papel importante em processos inflamatórios crônicos (ex: asma), nos quais drogas antagonistas como o Montelucaste (MTK) são cronicamente utilizadas. Ainda, LTs também parecem exercer influência sobre o metabolismo ósseo, porém os efeitos do uso crônico de MTK sobre tal tecido são pouco entendidos. Neste estudo avaliaram-se o efeitos cumulativos e dose resposta de MTK sobre os níveis plasmáticos de marcadores ósseos (Cálcio, Fosfato, fosfatase alcalina e TRAP) em camundongos 129Sv machos adultos, divididos em grupos C (tratados com SF 0,9%), MTK2 (2mg/Kg), e MTK4 (4mg/Kg) por via oral uma vez ao dia, ao longo de 8, 15 e 22 dias (n=5 animais por grupo e período). Ao final, realizaram-se as eutanásias e coleta do plasma para análises quantitativas bioquímicas, com nível de significância em 5%. Os níveis de cálcio (mg/dL) foram maiores no grupo MTK4 comparado aos C e MTK2 aos 8 e 22 dias. Os valores do fosfato (mg/dL) apontaram aumento significativo no grupo C aos 22 dias em comparação ao dia 8. Entre os grupos, houve aumento no MTK4 em comparação ao MTK2 aos 8 dias, bem como aumento significativo comparando o MTK4 e grupos C e MTK2 aos 22 dias. A TRAP apresentou níveis (U/L) menores no grupo C em comparação com MTK2 aos 15 dias e com MTK4 aos 22 dias. Não foram detectadas diferenças para fosfatase alcalina.
Em conclusão, administração continua e em diferentes doses de MTK alteram os marcadores ósseos plásmaticos, indicando um potencial efeito anabólico da droga no metabolismo deste tecido.
(Apoio: FAPs - FAPEAM)

---

PN0025 - Painel Aspirante
Área: 3 - Controle de infecção / Microbiologia / Imunologia

Efeito da terapia fotodinâmica em nanopartículas poliméricas incorporadas ao curcumin sobre queratinócitos orais
Minhaco VMTR, Tonon CC, Maquera-Huacho PM, Chorilli M, Spolidorio DMP
UNIVERSIDADE ESTADUAL PAULISTA - ARARAQUARA
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

O objetivo deste estudo foi sintetizar nanopartículas poliméricas incorporadas ao curcumin (Cur-NP) e avaliar o efeito citotóxico na terapia fotodinâmica. Cur-NPs foram sintetizadas com poliprolactona e caracterizadas por índice de polidispersão, potencial zeta, microscopia eletrônica de varredura e eficiência de encapsulamento. Queratinócitos orais humanos (NOK Si) foram cultivados em Modified Eagle's Medium (DMEM), e mantidos a 37 °C, CO₂ 5 %. Concentrações entre 0,195 e 200 µg/ml de Cur e Cur-NP, sem e com fotoativação (luz azul, 450 nm), foram testadas nos tempos 3, 4 e 5 minutos (dose: 3,96 J/cm², 5,28 J/cm² e 6,6 J/cm², respectivamente). Clorexidina 0,12% e peróxido de hidrogênio 3% foram utilizados como controles positivos e DMEM como controle negativo. Após os tratamentos, os resultados de viabilidade celular foram avaliados por alamarBlue. A viabilidade celular sem fotoativação, em todos os tempos e concentrações, foi maior que 70%, não apresentando efeito citotóxico. Quando fotoativadas por 3 min, as concentrações menores que 3,125 µg/ml Cur e 200 µg/ml Cur-NP não foram citotóxicas, assim como concentrações abaixo de 1,56 µg/ml de Cur e Cur-NP por 4 min e abaixo de 6,12 µg/ml de Cur e 3,125 µg/ml de Cur-NP por 5 min, quando comparados ao controle negativo (p<0,05).
Cur e Cur-NP quando aplicados em células NOK-Si, não apresentam citotoxicidade em baixas concentrações associados a curto período de tempo de fotossensibilização.
(Apoio: FAPs - Fapesp  N° 2018/10836-2)

---

PN0026 - Painel Aspirante
Área: 3 - Controle de infecção / Microbiologia / Imunologia

Efeitos antifúngicos do Atazanavir e Darunavir sobre Candida albicans: Estudo in vitro e in vivo
Fenley JC, Barros PP, Junqueira JC, Rossoni RD
Biociencias e Diagnostico Bucal - UNIVERSIDADE ESTADUAL PAULISTA - SÃO JOSÉ DOS CAMPOS
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

Portadores do Vírus da Imunodeficiência Humana (HIV) são propícios a apresentar candidoses na cavidade bucal. Os Inibidores de Protease do HIV (IP-HIVs) podem interferir na produção enzimática das SAPs de C. albicans e até o presente momento não existem estudos avaliando a atividade antifúngica de IP-HIVs de segunda ou terceira geração. Sendo assim, o objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos do Atazanavir (ATV) e Darunavir (DRV), dois IP-HIVs em uso clínico atual no Brasil, em C. albicans. Foram utilizadas duas cepas clínicas de C. albicans, isoladas de lesões de candidose orofaríngea de pacientes portadores de HIV, para avaliar a ação in vitro das drogas na determinação da concentração inibitória mínima (CIM), morfogênese e formação de biofilme (contagem de células viáveis e quantificação de biomassa). No estudo in vivo, o efeito protetor desses medicamentos foi avaliado na infecção experimental por C. albicans em Galleria mellonella. Os dados foram analisados por teste t, ANOVA e Kaplan-Meier (p<0,05). A CIM para ambos medicamentos foi 512 µg/mL. ATV e DRV reduziram significativamente a filamentação de C. albicans (p=0,0183). Nos biofilmes, a UFC/mL de C. albicans (ATV: 6,81 log ; DRV: 6,27 log) e a biomassa foram significantemente reduzidas. O uso profilário de ATV e DRV em G. mellonella infectadas com C. albicans prolongou em até 40% a sobrevivência das larvas (p=0,0004).
Conclui-se que ATV e DRV apresentaram atividade antifúngica, sendo capaz de inibir o crescimento, a morfogênese, a formação de biofilme de C. albicans e prevenir a candidose em G. mellonella.

---

PN0027 - Painel Aspirante
Área: 3 - Cariologia / Tecido Mineralizado

Engenharia de película adquirida por meio de tratamentos com proteínas/peptídeo para a proteção contra a erosão dental
Carvalho TS, Araujo TT, Ventura TMO, Dionizio A, Moraes SM, Marchetto R, Henrique Silva F, Buzalaf MAR
Ciências Biológicas - UNIVERSIDADE DE SÃO PAULO - BAURU
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

Este estudo avaliou in vivo alterações no proteoma da película adquirida do esmalte (PAE) após tratamento com cistatina derivada da cana (CaneCPI-5), hemoglobina humana (Hb), peptídeo derivado da estaterina (StN15) ou sua combinação antes da formação da PAE e subsequente desafio erosivo. Dez voluntários participaram de um protocolo cruzado e triplo-cego. Em cada uma das 5 fases, após a profilaxia, os voluntários bochecharam 1 mL (1min) das seguintes soluções: água deionizada, CaneCPI-5 0,1mg/mL, Hb 1,0mg/mL, StN15 1,88x10-5M ou a combinação de todos os tratamentos. Após a formação da PAE (2h), as proteínas resistentes ao ácido cítrico 1% (10µL, pH 2.5, 10s) foram coletadas e analisadas por nLC-ESI-MS/MS. Os tratamentos com proteínas/peptídeo testados isoladamente, aumentaram muitas proteínas ácido resistentes quando comparados com a combinação, assim como a combinação vs água. Os maiores aumentos foram observados na Submaxillary gland androgen-regulated protein 3B (11x, StN15), Histatin-1 (10x StN15 e 3x, combinação/água), Immunoglobulinas (2x, StN15 e 5x, combinação/água), Hemoglobin subunits (4x, StN15 e 2x, Hb), Lysozyme C e Protein S100-A9 (3x, StN15), Cystatin-B (2x, combinação/água) e Myeloperoxidase (1x, Cane).
Foram observados aumentos em proteínas ácido-resistentes na PAE quando as proteínas/peptídeos isolados foram comparados com a combinação, com destaque para o StN15. Esses resultados abrem caminho para que possam ser desenvolvidos produtos odontológicos, que venham a ser utilizados em ampla escala para o controle da erosão dentária.
(Apoio: FAPESP  N° 2019/16254-8)

---