Efeito da adição de hidróxido de cálcio e fibronectina a scaffolds nanofibrilares de policaprolactona sobre células pulpares humanas
Anselmi C, Mendes-Soares IP, Leite MLAS, Kitagawa FA, de-Souza-Costa CA, Hebling J
Morfologia e Clínica Infantil - UNIVERSIDADE ESTADUAL PAULISTA - ARARAQUARA
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse
O objetivo desse estudo foi investigar o efeito de scaffolds nanofibrilares de policaprolactona (PCL) contendo hidróxido de cálcio (HC) e fibronectina (FN) sobre células da polpa dental humana (HDPCs). Inicialmente a concentração de HC foi definida por meio da caracterização estrutural, propriedades físico-químicas e biológicas com HDPCs. Então, scaffolds de PCL (10%; m/v) incorporados ou não com 0,4% de HC foram adsorvidos com fibronectina (20 µg/mL). HDPCs semeadas sobre os scaffolds foram avaliadas quanto a viabilidade (alamarBlue, n=8; Live/Dead, n=4), adesão e espalhamento (F-actina, n=4), migração (Trans-well, n=4), expressão gênica (RT-qPCR, n=6), atividade de fosfatase alcalina (ALP, n=8) e formação de nódulos de mineralização (Alizarin red, n=8). Os dados foram submetidos a ANOVA e Tukey, Games-Howell ou Sidak (α=5%). Os resultados de Live/Dead e F-actina foram avaliados qualitativamente. A adição de HC e FN, isolados ou em associação, favoreceu a migração, espalhamento e viabilidade celular. A expressão de ALPL e DSPP e atividade de ALP não foram reguladas por HC e/ou FN. Regulação negativa do gene COL1A1 foi observada em todos os grupos experimentais comparados ao controle, enquanto o gene DMP1 foi regulado positivamente na presença de HC. HC favoreceu a formação de matriz mineralizada, a qual não foi influenciada pela presença de FN. Em conclusão, a incorporação de 0,4% HC aumentou o potencial odontogênico de HDPCs independente da presença de FN. Scaffolds de PCL+0,4% HC são promissores para estratégias de regeneração do complexo dentina-polpa. (Apoio: FAPs - Fapesp-MS N° 2019/11192-4 | FAPs - Fapesp-AR N° 2019/16473-1 | CNPq N° 303391/2019-7)FC015 - Fórum Científico
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5 - Materiais Dentários
Nanocápsulas de metronidazol como agentes antimicrobianos em cimentos endodônticos bioativos
Balbinot GS, Leitune VCB, Zatta KC, Benin T, Guterres SS, Collares FM
Odontologia Conservadora - UNIVERSIDADE FEDERAL DO RIO GRANDE DO SUL
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse
O objetivo deste estudo foi desenvolver um cimento endodôntico a base de silicato de cálcio contendo metronidazol nanoencapsulado (MTZNCP) como agente antimicrobiano. Foi desenvolvido um cimento com sistema pó:líquido. Para a formulação do pó foi utilizado um silicato de cálcio (CS) produzido pela rota sol-gel com adição de 10% de tungstato de cálcio. Para o líquido, uma solução aquosa de MTZNCP foi formulada avaliada por sua nanoestrutura e teor do fármaco encapsulado. Soluções com 0,3mg/ml e 0,15mg/ml de MTZNCP foram testadas e um grupo controle foi formulado utilizando água como líquido para a reação. Os cimentos foram caracterizados quando à suas propriedades físico-químicas e atividade antimicrobianas contra Entreococcus faecallis. O CS utilizado apresentou tamanho médio de 11µm e área superficial de 11,96m2/g. As MTZNCP apresentaram 83,44 (±4,63)% de teor do fármaco com tamanho médio de 157,06nm. As MTZNCP não alteraram o tempo de presa e a radiopacidade dos cimentos, e aumentaram o escoamento dos materiais. A resistência à compressão foi reduzida com a adição de MTZNCP, atingindo 22,34MPa no grupo contendo 0,3mg/ml. Todas as formulações promoveram aumento do pH imediatamente após a imersão em água e deposição mineral na superfície do material com imersão em SBF após 14 dias. A adição de 0,3mg/ml de MTZNCP reduziu a viabilidade de E. faecalis em análise planctônica. A adição de 0,3mg/ml de MTZNCP foi efetiva para o desenvolvimento de cimentos biocerâmicos antimicrobianos para aplicação em procedimentos endodônticos regenerativos.FC016 - Fórum Científico
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5 - Materiais Dentários
Capacidade de remineralização dentinária de diferentes tipos de materiais restauradores bioativos - estudo in vitro
Pires PM, Gracia MTP, Ionescu AC, Sauro S, Neves AA
Odontopediatria e Ortodontia - UNIVERSIDADE FEDERAL DO RIO DE JANEIRO
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse
Objetivou-se avaliar a capacidade de remineralização da dentina afetada por cárie ou desmineralizada após restauração com materiais bioativos. Cavidades classe I em 68 molares humanos foram submetidas a um modelo cariogênico microbiano, sendo divididas em 4 grupos: cimento de ionômero de vidro (CIV); MTA; RMTA (modificado por resina) e controle (compósito). O teste de microdureza (ΔKHN) foi realizado em 40 amostras (10/grupo) cortadas em fatias de 1,5mm e armazenadas por 15 e 45 dias em saliva artificial. Dezesseis amostras (4/grupo) foram processadas para Confocal e MEV. O micro-CT foi em 12 amostras íntegras (2/grupo) no período inicial, após 45 e 90 dias. Para FTIR, oito novas amostras planas de dentina (2/grupo) foram totalmente desmineralizadas em ácido fosfórico 10% por 24h e cobertas por cada material (3 mm). A análise estatística foi com nível de significância de 5%. MTA e RMTA obtiveram maiores valores na % de aumento da ΔKHN (61,5% e 15,1%) quando comparados ao CIV (10,5%) após 45 dias (p<0,05). Além disso, apresentaram deposição de apatita (FTIR) e cálcio difundido na lesão e nos túbulos dentinários (Confocal/MEV). O micro-CT demonstrou uma diminuição no espaço da interface entre a dentina e esses materiais, sugestiva de remineralização. Nenhuma redução foi observada no controle, que mostrou degradação ao longo do tempo. Todos os materiais bioativos foram capazes de induzir remineralização, entretanto, os materiais a base de silicato de cálcio podem fornecer precipitação de apatita de maneira rápida e promover a recuperação da dureza ao longo do tempo. (Apoio: CAPES N° 001)FC017 - Fórum Científico
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5 - Materiais Dentários
Propriedades mecânicas, antimicrobianas e microestrutura da zircônia com vidro de prata
Silva AC, Ribeiro AOP, Campos TMB, Melo RM
Odontologia Restauradora - UNIVERSIDADE ESTADUAL PAULISTA - SÃO JOSÉ DOS CAMPOS
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse
Este estudo avaliou a resistência mecânica, microestrutura e atividade antimicrobiana de zircônia com vidro de prata e de infiltração. Foram elaborados 210 discos de zircônia 3Y-TZP, divididos em (n=30): YZ polida, YZ + glaze, YZ + Ag 4%, YZ + Ag 5%, YZ com vidro, YZ com vidro + Ag 4% e YZ com vidro + Ag 5%. Realizou-se testes de resistência à flexão biaxial, Difração de Raios X (DRX), análise da translucidez, fractográfica e da superfície por Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV) e Contagem das Unidades Formadoras de Colônia (UFC) para S. mutans. As médias de resistência à flexão biaxial foram: YZ polida (819,0 MPaC); YZ com glaze (790,8 MPaC); YZ + Ag 4% (519,2 MPaC); YZ + Ag 5% (612,1D); YZ com vidro (1149,7 MPaA); YZ com vidro + Ag 4% (928,2 MPaB) e YZ com vidro + Ag 5% (791,5C). O DRX mostrou cristais de combeita nos grupos YZ com vidro + Ag 4%/5%. Para translucidez as médias e desvio padrão foram: YZ polida (9,93 ± 0,41), YZ + glaze (10,76 ± 0,55), YZ + Ag 4% (10,10 ± 0,57), YZ + Ag 5% (9,07 ± 0,80), YZ c/ vidro (3,46 ± 0,14), YZ c/ vidro + Ag 4% (3,30 ± 0,29) e YZ c/ vidro + Ag 5% (3,07 ± 0,34). O MEV mostrou irregularidades na superfície dos grupos com vidro de prata enquanto YZ com vidro e YZ + glaze, superfícies lisas. A fractografia de todos os grupos, exceto YZ com vidro, mostrou a origem da fratura na camada de glaze e vidro com prata. Já o grupo YZ com vidro, dentro da zircônia. Na UFC, o grupo YZ + Ag 5% apresentou menos colônias. Conclui-se que o grupo YZ com vidro foi mais resistente à fratura e YZ + Ag 5% foi antimicrobiano. O vidro com prata não alterou a translucidez, enquanto o vidro de infiltração modificou. (Apoio: FAPESP N° 2019/21736-1)FC018 - Fórum Científico
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5 - Dentística
Efeito do momento da hibridização dentinária na resistência de união de restaurações diretas em dentes tratados endodonticamente
Maffra PET, Carvalho MA, Lazari-Carvalho PC, Izelli TF, Magne P, Estrela C
UNIVERSIDADE FEDERAL DE GOIÁS
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse
Este estudo avaliou o efeito do momento da hibridização dentinária (Hd) em relação ao contato das substâncias químicas endodônticas e do repreparo da dentina na resistência de união à dentina de dentes humanos restaurados com resina composta de forma direta. Vinte molares humanos foram distribuídos em um grupo controle e três grupos experimentais (n=5): C - restauração direta em resina composta, sendo o grupo controle sem exposição às substâncias químicas; HdT - hibridização dentinária tardia com Hd no momento da restauração final, após exposição às substâncias químicas; HdP - hibridização dentinária prévia com Hd previamente à exposição às substâncias químicas; HdTR - mesmo que HdT mas com repreparo da dentina antes da Hd. Após o corte coronário do dente, a dentina foi exposta à hipoclorito de sódio 2,5%, EDTA 17% e cimento endodôntico. Em seguida o dente foi restaurado com resina composta e, após 24 horas, o teste de microtração foi realizado. O maior valor de resistência de união foi encontrado no grupo HdTR (45,21 MPa ±5,66), logo em seguida o HdP (43,12 MPa ±5,08), o grupo controle (42,68 MPa ±5,95) e o menor valor no grupo HdT (12,84 MPa ±4,27). O grupo controle (C) não apresentou diferença estatisticamente significante em relação a HdP e HdTR. Pode-se concluir que a hibridização dentinária previamente à exposição a substâncias químicas utilizadas no tratamento endodôntico ou o repreparo dentinário após essa exposição influenciaram positivamente a resistência de união à microtração das amostras estudadas. (Apoio: CNPq N° 150054/2018-1)FC019 - Fórum Científico
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6 - Prótese
Dentina bovina como alternativa para testes de citotoxicidade indireta de materiais resinosos
Souza IR, Leite MLAS, Ribeiro RAO, Hebling J, de-Souza-Costa CA
Fisiologia e Patologia - UNIVERSIDADE ESTADUAL PAULISTA - ARARAQUARA
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse
Foi avaliado a influência do substrato (dentina humana/DH e dentina bovina/DB) sobre o efeito citotóxico indireto de materiais resinosos. Inicialmente, o número e diâmetro dos túbulos dentinários presentes na DH e DB foram avaliados (Teste T; α=5%). Então, células odontoblastóides MDPC-23 foram semeadas na superfície pulpar de discos de DH e DB posicionados em câmaras pulpares artificiais. Os seguintes tratamentos foram realizados na superfície oclusal dos discos: G1/DH e G2/DB: sem tratamento (controle negativo); G3/DH e G4/DB: Single Bond Universal; G5/DH e G6/DB: RelyX Luting 2; G7/DH e G8/DB: RelyX U200; G9/DH e G10/DB: RelyX Ultimate. A viabilidade (V) e morfologia (M) das MDPC-23 aderidas aos discos foram avaliadas. Os extratos (meio de cultura + componentes dos materiais difundidos pelos discos) foram aplicados sobre MDPC-23 e células pulpares humanas (hDPCs) semeadas em placas de 96 poços, para posteriores avaliações de V, adesão/espalhamento (AE), atividade de fosfatase alcalina (ALP) e deposição de nódulos de mineralização (NM) (ANOVA/Tukey; α=5%). Apesar da DB apresentar maior diâmetro dos túbulos dentinários (p<0,05), não houve diferença de citotoxicidade quando os mesmos materiais foram aplicados sobre DH e DB (p>0,05). Apesar de menor V, AE, ALP e NM em G5 e G6 quando comparados a G1 e G2 para ambas as células (p<0,05), G7 e G8 foram semelhantes a G1 e G2 (p>0,05). Concluiu-se que, para este modelo in vitro de citotoxicidade, a DB pode ser usada para substituir a DH e que o cimento RelyX U200 é o único material não citotóxico testado. (Apoio: FAPs - FAPESP N° 2019/05788-1)FC020 - Fórum Científico
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7 - Patologia Oral
Caracterização das estomatites relacionadas ao uso de inibidores de mTOR e pesquisa dos herpesvírus em transplantados renais
Macedo DS, Pierrotti LC, Franco JB, David-Neto E, Agena F, Mamana AC, Braz-Silva PH, Martins F
Odontologia - UNIVERSIDADE SANTO AMARO
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse
O objetivo desse estudo foi detectar a expressão do DNA dos herpesvírus humanos, em sangue e saliva de pacientes transplantados (Tx) renais em uso de inibidores de mTOR (imTOR) e caracterizar estomatites induzidas pelo uso de imTOR (miAS). O grupo de estudo (G1), foi composto por pacientes pós-Tx renal em uso de imTOR e o grupo controle (G2), por pacientes em uso de outros imunossupressores. Foram realizadas coletas das amostras após 1 mês da introdução de imTOR. Foram avaliados 32 pacientes (G1=16; G2=16), 17 homens e 15 mulheres, idade média de 49 anos. 91,17% Tx de doadores falecidos e 8,82% intervivos. Dose média do imTOR (1-10mg/dia); efeitos adversos prováveis ao uso de imTOR: 28,12% anemia (9), 21,87% hiperglicemia (7), 15,62% diarreia (5), 18,75% náusea (6), 15,62% fadiga (5) e 31,25% mIAS (5). Entre os 15% dos pacientes que exibiram mIAS, foram graduadas como grau 1. Outras alterações observadas neste grupo foram 4 casos de candidíase oral. No G1 40% (n=15) e G2 18% (n=3) exibiram viremia por poliomavírus em sangue. As amostras coletadas foram analisadas utilizando o PCR Pan Herpes, com positividade em saliva, em 71,87% (n=23) para HHV-7; 28,12% (n=9) EBV; 18,75% (n=6) CMV; 6,25% (n=2) HHV-6; 6,25% (n=2) HSV-1 e 15,62% (n=5) dos resultados foram não reagentes para Pan Herpes, independente do grupo. Em plasma, 3% (n=1) foram positivas para HHV-7; 3% (n=1) EBV; 18,75% (n=6) CMV e 62,5% (n=20) foram não reagentes para PanHerpes. Nossos resultados preliminares mostraram discordância sorológica da infecção por herpesvirus em sangue e saliva e prevalência alta de miAS. (Apoio: FAPESP N° 2018/02568-8)FC021 - Fórum Científico
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7 - Patologia Oral
Proteomic profile and identification of significant markers in the transition of Pleomorphic Adenoma to Carcinoma ex pleomorphic adenoma
de Lima-Souza RA, Scarini JF, Crescencio LR, Egal ESA, Lavareze L, Paes Leme AF, Altemani A, Mariano FV
Diagnóstico Oral - FACULDADE DE ODONTOLOGIA DE PIRACICABA
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse
Carcinoma ex pleomorphic adenoma (CXPA) is a rare malignant tumor arising from a Pleomorphic adenoma (PA) and presents an aggressive clinical behavior. CXPA etiopathogenesis remains poorly elucidated, but is believed that accumulation of genetic, epigenetic and metabolic alterations may be responsible for its malignant transformation. The objective of this study was to analyze the proteomic profile of salivary Pleomorphic Adenoma and Carcinoma ex pleomorphic adenoma (CXPA) samples and correlate it with the malignant transformation of the PA. Thirty samples (10 PA, 16 CXPA, and 4 residual PA - RPA) were microdissected submitted to liquid chromatography-tandem mass spectrometry (LC-MS/MS). The proteomic data and protein identification were analyzed through LC-MS/MS spectra and by using the MaxQuant software. The proteomic analysis identified and quantified a total of 240 proteins, being 135 proteins shared by the three lesion and 39 proteins, 4 and 17 exclusively detected in PA, RPA, and CXPA respectively. The shared proteins were divided into six subgroups and the proteins showed statistically significant differences (p > 0,05). The proteins that present a Log2-ratio > or < 2.5 were selected. In this work, we demonstrated the proteomic profile of PA along its malignant transformation based on MS. Additionally, 7 proteins (AP1M1, APOA1, DCD, HBB, HP, SLC4A1, and SYCP1) were proposed as potential markers, some of which may be associated with the progression or suppression of malignant transformation of PA. (Apoio: FAPs - FAPESP N° 2019/0698-2 | FAPs - FAPESP N° 2015/07304-0 | CAPES N° Finance Code: 001)FC022 - Fórum Científico
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7 - Patologia Oral
Efeito da Terapia Fotodinâmica na Osteonecrose induzida por Ácido Zoledrônico em Ratos
Praxedes-Neto RAL, Dantas TS, Alves APNN, Rodrigues MIQ, Silva PGB, Lemos JVM, Lima LA, Lima RA
Faculdade de Odontologia - CENTRO UNIVERSITÁRIO CHRISTUS
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse
O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da Terapia Fotodinâmica (PDT), utilizando o azul de metileno (AM) e laser de baixa potência, no osso alveolar de ratos submetidos a modelo de osteonecrose induzida por Ácido Zoledrônico (AZ). Os animais foram divididos em 6 grupos: um grupo tratado com solução salina sem PDT, um grupo tratado com solução salina com PDT, um grupo tratado com AZ sem PDT, um grupo tratado com AZ com PDT, um grupo tratado com AZ com laser vermelho e um grupo tratado com AZ com AM. Foram realizadas as induções a osteonecrose nos grupos tratados com AZ 0,20 mg/kg ou solução salina. Após um mês da última administração, foi realizada a exodontia dos 1 os molares inferiores esquerdos. A PDT e os demais tratamentos foram realizados em seguida. O grupo AZ, tratado com PDT apresentou percentual de osteócitos apoptóticos significantemente inferior aos animais tratados com AZ apenas (p<0,001). O grupo AZ +AM (86,50±16,09), LUZ (21,20±4,21) e PDT (19,75±2,76) apresentaram redução significativa do número de mononucleares em relação ao grupo tratado com AZ (p<0,001). Os grupos AZ+LUZ e AZ+PDT apresentaram redução significativa do número de células CD 68+ e CD3+, em relação ao grupo tratado apenas com AZ. O número de células expressando INF-y obteve uma redução estatisticamente significante nos grupos co-tratados com LUZ e PDT, quando comparados ao grupo AZ. A PDT atenuou o processo inflamatório crônico e sinais de apoptose, com uma redução da resposta por Linfócitos Th1, em alvéolos dentários de ratos submetidos devido a modelo de osteonecrose induzida por AZ.FC023 - Fórum Científico
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8 - Periodontia
SNP rs6667202 associado a periodontite Grau C regula a expressão de IL-10 em fibroblastos gengivais primários após estímulo bacteriano
Stolf CS, Sacramento CM, Paz HES, Ruiz KGS, Cogo-Müller K, Araujo CF, Santamaria MP, Casarin RCV
Prótese e Periodontia - FACULDADE DE ODONTOLOGIA DE PIRACICABA
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse
O polimorfismo de nucleotídeo único (SNP) rs6667202 (C>A), região promotora do gene IL10, foi associado a periodontite estágio 3 ou 4 Grau C (Perio4C) na população brasileira. Porém, ainda não se sabe como este pode influenciar na resposta imune individual. Assim, esse estudo buscou avaliar a funcionalidade desse SNP em fibroblastos gengivais (FGs) de indivíduos com Perio4C e de indivíduos com saúde periodontal (SP) estimulados com extrato proteico de A. actinomycetemcomitans (AaPE). 9 pacientes com SP e 8 com Perio4C foram segregados de acordo com seu genótipo (AA, AC ou CC) para esse SNP, e uma biópsia foi realizada para estabelecer a cultura primária dos FGs, os quais foram expostos ao AaPE a 5 µg/mL durante 1.5 horas. Ao final desse período, alíquotas do sobrenadante foram submetidas à análise imunoenzimática (MAGPIX) para detecção da interleucina-10 (IL-10) e o RNA total dos FGs foi extraído para análise de expressão gênica por rtPCR. Em SP os genótipos AA e AC (presença do alelo alterado A) estão relacionados à uma menor expressão de IL10 (p = 0.027 e p < 0.0001) e consequente menor produção de IL-10 (p = 0.002 e p = 0.001) quando comparados ao genótipo CC. Perio4C apresentou tanto uma similaridade na produção de IL-10 entre os genótipos (p > 0.05), quanto menor produção que SP (p = 0.0022), indicando uma resposta ao AaPE ocorrendo por vias diferentes. Conclui-se que rs6667202 apresenta uma ação funcional em SP, diminuindo a produção de IL-10 e sendo um potencial indicador de risco biológico. Em Perio4C, uma resposta aberrante foi observada, não diretamente associada a esse SNP.