PI0381 - Painel Iniciante
Área: 1 - Biologia craniofacial

Avaliação da adesão e imunolocalização de proteínas em células osteoblásticas cultivadas em meio condicionado de macrófagos Raw 264.7
Cassiani MC, Suguimoto SP, Fernandes RR, Sanchez PKV, Prado KFB
Biologia Básica e Oral - UNIVERSIDADE DE SÃO PAULO - RIBEIRÃO PRETO
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

A osteogênese é alcançada não somente por células osteoblásticas do sistema esquelético, mas também como resultado de uma cooperação com múltiplos sistemas, entre eles, o imune. Células como macrófagos liberam várias moléculas sinalizadoras que poderiam afetar positiva ou negativamente a capacidade osteogênica dos osteoblastos. Sendo assim, o objetivo do presente projeto foi avaliar a influência do meio condicionado de macrófagos RAW 264.7 polarizados em M1 por meio de lipopolissacarídeo (LPS) na adesão, proliferação e imunolocalização das proteínas fosfatase alcalina (ALP), sialoproteína óssea (BSP) e osteopontina (OPN) em células osteoblásticas MC3T3-E1. Após o armazenamento do meio condicionado, o cultivo das células osteoblásticas foi realizado em meio de cultura osteogênico e as células divididas em grupo controle (C) e de células tratadas com 50% de meio condicionado de macrófagos (MC). Os dados quantitativos foram submetidos à teste estatístico para p<0.05. A adesão celular foi maior para o grupo MC apesar de ausência de significância estatística. A análise qualitativa com marcador Ki-67 revelou maior proliferação celular no grupo MC. A imunolocalização das proteínas ALP e BSP foi similar entre os grupos e maior no grupo MC para a proteína OPN.
Os resultados sugerem que a presença do meio condicionado de macrófagos possa estimular a adesão e a atividade funcional de células osteoblásticas.
(Apoio: FAPESP  N° 2018/23586-4)

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PI0382 - Painel Iniciante
Área: 1 - Cirurgia bucomaxilofacial

Avaliação do nível de compreensão dos pacientes quanto às orientações pós-operatórias cirúrgicas: estudo clínico controlado randomizado
Mattos AHS, Jóias RM, Santamaria MP, Jóias RP
Curso de Odontologia - UNIVERSIDADE METODISTA DE SÃO PAULO
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

Esse estudo foi conduzido em razão de avaliar o nível de compreensão e adesão às orientações pós-operatórias fornecidas aos pacientes de maneira exclusivamente oral, e oral complementada por escrito. Para tanto, 110 indivíduos, entre 18-59 anos de idade, do sexo feminino (n=52) e masculino (n=58), submetidos a exodontia, foram divididos, aleatoriamente, em 2 grupos: G1 (n=55) recebeu orientação oral; e G2 (n=55), oral e escrita. Após 7 dias, na consulta de retorno para remoção da sutura, os pacientes responderam a um questionário para verificar o nível de compreensão e adesão às orientações fornecidas posteriormente a cirurgia. Em seguida, os indivíduos foram submetidos a avaliação clínica profissional (checklist) da condição bucal no período pós-operatório. Todos os dados do questionário e checklist foram tabulados e submetidos a análise estatística, através dos testes Kolmogorov-Smirnov, Mann-Whitney, Kruskal-Wallis, Qui-Quadrado, Correlação de Spearman e Regressão Logística, ao nível de significância de 5%. O escore obtido no Questionário foi de 5,22 (G1) e 10,16 (G2); no Checklist, 2,80 para o G1 e 5,62 para o G2. A soma do escore do Questionário com o Checklist resultou no Sucesso Pós-Operatório com média de 15,78 (G2) e 8,02 (G1) (P-valor <0,001). O (G2) apresentou melhor adesão e compreensão, maior sucesso no pós-operatório e no checklist, tendo maior média que o (G1).
Para o sucesso no pós-operatório, sugere-se que, além das orientações verbais, sejam também fornecidas orientações por escrito, resultando em maior adesão e compreensão pelos pacientes.

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PI0383 - Painel Iniciante
Área: 1 - Cirurgia bucomaxilofacial

Avaliação do potencial osteogênico de populações de células-tronco mesenquimais derivadas do ligamento periodontal
Santos IC, Adolpho LF, Lopes HB, Ruiz KGS, Assis RIF, Andia DC, Rosa AL, Freitas GP
Ctbmf e Periodontia - UNIVERSIDADE DE SÃO PAULO - RIBEIRÃO PRETO
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

O potencial osteogênico de células-tronco mesenquimais (CTMs) é um parâmetro relevante do ponto de vista da terapia celular para o reparo do tecido ósseo. O tecido periodontal é uma fonte de CTMs terapeuticamente relevante por ser facilmente obtido a partir de dentes hígidos com indicação de extração. Assim, o objetivo do presente estudo foi avaliar a capacidade de diferenciação osteoblástica de duas populações de CTMs obtidas do ligamento periodontal de terceiros molares inclusos extraídos de dois pacientes distintos, fornecidas pelo Biobanco-Periocells (FOP-UNICAMP). Para isso, as CTMs foram cultivadas em meio não-indutor de diferenciação para avaliação da proliferação celular aos 5 dias e de marcadores de superfície por citometria de fluxo aos 10 dias e em meio osteogênico para avaliação da atividade de fosfatase alcalina(ALP) aos 17 dias e mineralização da matriz extracelular aos 21 dias.Os dados foram comparados pelo teste Mann-Whitney (p ≤ 0.05, n=5). Os resultados mostraram um perfil semelhante de proliferação celular e de expressão de marcadores de superfície, mas potenciais osteogênicos distintos, evidenciados por diferentes atividade de ALP e mineralização da matriz extracelular, entre as duas populações de CTMs.
Portanto, concluímos que a avaliação do potencial osteogênico de populações de CTMs do ligamento periodontal previamente ao seu emprego terapêutico é fundamental para otimizar o prognóstico do tratamento de defeitos ósseos.
(Apoio: FAPESP  N° 2019/10076-0)

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PI0384 - Painel Iniciante
Área: 1 - Cirurgia bucomaxilofacial

Análise dos exames laboratoriais pré-operatórios em pacientes que realizam exodontia na clínica escola
Mazeli IB, Barbieri RB, Mancini CE, Gonçalves KF
FACULDADE DE SINOP
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

Compete ao cirurgião-dentista solicitar exames laboratoriais, pois auxiliam no diagnóstico, a identificar problemas sistêmicos e podem interferir no prognóstico ou até mesmo contraindicar uma cirurgia. O objetivo da pesquisa foi avaliar os exames laboratoriais pré-operatórios solicitados previamente ao tratamento cirúrgico de exodontia dos pacientes atendidos na clínica escola. A metodologia utilizada foi um estudo retrospectivo por meio de análise documental. Amostra por conveniência totalizando 311 prontuários analisados referentes a 2018. Variáveis coletadas: idade, sexo, quantidade de hemácias, hemoglobina, hematócrito, índices hematimétricos, leucócitos totais e diferencial, plaquetas, glicemia de jejum, tempo de sangramento, tempo de coagulação e tempo de ativação de pró-trombina. Dados analisados no SPSS versão 20.0, aplicando testes qui-quadrado, Phi e Cramér's V. Apresentadas frequências absolutas e relativas assim como a utilização da correlação de Person com nível de significância 5%. Os resultados apontam que a variável sexo feminino englobou 54,3% da amostra, e idade de 18-30 anos 41,1%. Variável hemograma maior tendência para sexo feminino com 54,3% e para idade entre 18-30 anos 41,2%. Tempo de Sangramento e Glicemia são estatisticamente significativos e dependem da variável sexo.
Conclui-se que a avaliação do paciente deve ser individualizada de acordo com sua história médica e odontológica atual, sendo importante a solicitação de exames complementares como os de laboratórios para melhor planejamento do caso.

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PI0385 - Painel Iniciante
Área: 1 - Biologia craniofacial

Células-tronco mesenquimais de ratos saudáveis aumentam o potencial osteogênico de células-tronco de ratos osteoporóticos
Quiles GK, Souza ATP, Freitas GP, Lopes HB, Weffort D, Oliveira FS, Beloti MM, Rosa AL
Biologia Básica e Oral - UNIVERSIDADE DE SÃO PAULO - RIBEIRÃO PRETO
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

Na terapia celular para o tratamento de defeitos ósseos utiliza-se células-tronco mesenquimais (CTM). Na presença de osteoporose (OP), CTM de doadores saudáveis (CTM-S), após serem injetadas, irão interagir com CTM de receptores com OP (CTM-OP) sem que se saiba como isso afeta as CTM-OP. Portanto, avaliamos in vitro a influência de CTM-S na diferenciação osteoblástica de CTM-OP, usando modelo de co-cultura indireta. CTM obtidas de medula óssea de ratos saudáveis e com osteoporose, induzida por orquidectomia, foram mantidas em co-cultura (CTM-S/CTM-OP, CTM-S/CTM-S e CTM-OP/CTM-OP) em meio osteogênico. A diferenciação osteoblástica foi avaliada pela expressão gênica de Runx2 (n=3), atividade de fosfatase alcalina (ALP) (n=5) e mineralização da matriz extracelular (n=5). Os dados foram comparados por ANOVA (p≤0,05). Aos 10 dias, a expressão de Runx2 foi CTM-S/CTM-OP>CTM-S/CTM-S>CTM-OP/CTM-OP (p<0,001) e a atividade de ALP foi CTM-S/CTM-S>CTM-S/CTM-OP>CTM-OP/CTM/OP (p<0,001). Aos 17 dias, a mineralização foi CTM-S/CTM-S=CTM-S/CTM-OP>CTM-OP/CTM/OP (p<0,001).
Esses resultados confirmam que a OP reduz a diferenciação osteoblástica de CTM e mostram que CTM-S são capazes de recuperar o potencial osteogênico das CTM-OP e, portanto, terapia celular baseada no uso CTM de doadores saudáveis pode ser uma estratégia promissora para tratar defeitos ósseos na presença de OP.
(Apoio: FAPESP  N° 2017/12622-7  |  FAPESP  N° 2018/13290-0  |  FAPESP  N° 2019/18221-0)

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PI0386 - Painel Iniciante
Área: 1 - Biologia craniofacial

Diabetes tipo 2 prejudica o reparo alveolar de ratos
Inoue BKN, Pitol-Palin L, Wajima CS, De-Souza-batista FR, Matsushita DH, Okamoto R
Ciências Básicas - UNIVERSIDADE ESTADUAL PAULISTA - ARAÇATUBA
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

O trabalho propõe explorar através de análises imunoistoquímica, microtomográfica e de microscopia confocal, a dinâmica do reparo ósseo alveolar em ratos diabéticos tipo 2. Vinte e quatro ratos foram divididos em dois grupos: Normoglicêmicos (CO) e Diabéticos tipo 2 (DM2). O DM2 foi induzido por dieta de cafeteria e aplicação única de Estreptozotocina (35mg/kg). Após a confirmação do DM2, os animais foram submetidos a exodontia do incisivo superior e eutanasiados após 14 e 42 dias. Para análise imunoistoquímica, foram utilizados os anticorpos OPG e RANKL para avaliar a remodelação óssea 14 e 42 dias após exodontia. A análise microtomográfica avaliou percentual de volume ósseo (BV/TV) e espessura do trabeculado (Tb.th). A microscopia confocal avaliou a dinâmica do tecido ósseo e superfície de mineralização ativa. Os dados foram submetidos a análise estatística com nível de significância de 5%. Na análise imunoistoquímica, obteve maior expressão de células da linhagem osteoblástica para RANKL em relação a OPG no grupo DM2. O grupo CO teve um equilíbrio entre marcações celulares para ambas proteínas. Na Micro-CT, houve diferença estatisticamente significante entre os grupos em ambos os parâmetros (p < 0,05). Na microscopia confocal, o grupo CO teve maior precipitação de minerais sobre a matriz colágena, com uma taxa de mineralização significativamente maior em relação aos animais DM2 (p < 0,05).
Em conclusão, animais com DM2 apresentam um processo de reparo alveolar prejudicado com quantidade e qualidade óssea alveolar inferiores aos animais normoglicêmicos
(Apoio: FAPs - Fapesp  N° 2016/25747-0)

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PI0387 - Painel Iniciante
Área: 1 - Cirurgia bucomaxilofacial

Comparação da qualidade do sono entre indivíduos sem deformidade dentofacial e pacientes de cirurgia ortognática com perfil facial II e III
Penteado GM, Flores EKB, Gerber JT, Fanderuff M, Costa DJ, Sebastiani AM, Scariot R, Storrer CLM
UNIVERSIDADE POSITIVO
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

O objetivo deste trabalho foi comparar a qualidade do sono de indivíduos sem deformidades dentofaciais (DDF) com pacientes que buscavam a cirurgia ortognática apresentando perfil facial II e III. Um estudo transversal foi realizado com 227 indivíduos, 160 correspondiam ao grupo controle sem deformidade dentofacial e dos 67 pacientes do grupo caso, 27 apresentavam perfil facial II e 40 apresentavam perfil facial III. Foi aplicado o questionário Sleep Assesment Questionnaire (SAQ) da Universidade de Toronto para avaliar possíveis distúrbios do sono. Através deste questionário, foi avaliado o score geral, e o score de 6 diferentes domínios: insônia, sono não-restaurador, distúrbio do tempo do sono, sonolência diurna, apneia e inquietação. Os dados foram submetidos a análise estatística para comparação dos scores entre os 3 grupos, foi considerado significante um valor de p < 0,05. Os pacientes com perfil facial III apresentaram melhores scores na qualidade do sono em geral e também para os domínios sono não reparador, distúrbio do horário do sono, apneia do sono e inquietação, quando comparados ao grupo sem DDF e com os pacientes com perfil facial II (p < 0,05). Os indivíduos com perfil facial II foram semelhantes aos indivíduos sem DDF para a qualidade do sono (p > 0,05).
Contrariando a nossa hipótese inicial, os indivíduos com perfil facial II não tiveram diferenças significativas na qualidade do sono em comparação ao grupo sem DDF, e os indivíduos com perfil facial III apresentaram melhor qualidade do sono.

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PI0388 - Painel Iniciante
Área: 1 - Cirurgia bucomaxilofacial

Efeito Osteogênico da Associação de VEGF-A e BMP-9 em Células-Tronco Mesenquimais Derivadas de Medula Óssea e Tecido Adiposo
Gomes MPO, Lopes HB, Freitas GP, Beloti MM, Rosa AL
Biologia Básica e Oral - UNIVERSIDADE DE SÃO PAULO - RIBEIRÃO PRETO
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

Fatores de crescimento são relevantes na diferenciação osteoblástica de células-tronco mesenquimais (CTMs), dentre eles o fator de crescimento vascular endotelial do tipo A (VEGF-A) e a proteína óssea morfogenética 9 (BMP-9). O objetivo deste estudo foi avaliar in vitro o efeito da associação de VEGF-A e BMP-9 na diferenciação osteoblástica de CTMs derivadas da medula óssea (CTMs-MO) e do tecido adiposo (CTMs-TA). Para isso, CTMs-MO e CTMs-TA obtidas de ratos foram cultivadas em meio alfa-MEM suplementado com 10% de soro fetal bovino e antibióticos (Controle) e em meio suplementado com VEGF-A (100 ng/mL), BMP-9 (100 ng/mL) ou associação VEGF-A + BMP-9 (100 ng/mL para ambos) por até 17 dias. Aos 7 dias, foram avaliadas a expressão gênica de Osterix (Osx), Fosfatase alcalina (Alp) e Osteopontina (Opn) por PCR em tempo real e a atividade de fosfatase alcalina (ALP); aos 17 dias, a formação de matriz mineralizada. Os dados foram comparados por ANOVA seguido de teste de Tukey, p≤0,05. O VEGF-A não afetou a expressão gênica e a atividade de ALP em ambas as culturas (p>0,9), mas aumentou a mineralização de CTMs-MO (p<0,001). A BMP-9 aumentou a expressão gênica de Osx, Alp e Opn em ambos os tipos celulares (p<0,001), mas a atividade de ALP e a mineralização somente em CTMs-TA (p≤0,05). A associação VEGF-A + BMP-9 induziu a maior expressão dos marcadores osteogênicos em CTMs-TA (p<0,001), maior atividade de ALP em ambos os tipos celulares (p≤0,05), mas não aumentou a mineralização.
A combinação de BMP-9 e VEGF-A é mais eficaz na diferenciação osteoblástica de CTMs-TA.
(Apoio: Fapesp  N° 2017/12622-7  |  Fapesp  N° 2018/19559-1)

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PI0389 - Painel Iniciante
Área: 1 - Cirurgia bucomaxilofacial

Papel da terapia de fotobiomodulação no destino das células-tronco mesenquimais derivadas da medula óssea de ratos diabéticos
Kfouri CC, Kfouri CC, Copete IN, Sanchez GZ, Marques MM, Ferraz EP
Cirurgia, Prótese e Traumatologia - UNIVERSIDADE DE SÃO PAULO - SÃO PAULO
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

O Diabetes Mellitus (DM) é uma doença crônica com efeitos negativos ao metabolismo ósseo, que pode estar relacionado ao destino de células-tronco mesenquimais da medula óssea (CTM-MO). Estudos indicaram que CTM de portadores de DM tendem a se diferenciar em adipócitos (AD) em detrimento dos osteoblastos (OB). A terapia por fotobiomodulação (FBM) resultou na recuperação do potencial osteogênico de CTM-MO de ratos diabéticos. O objetivo deste trabalho foi avaliar o papel da FBM na diferenciação adipocítica ou osteoblástica de CTM-MO em condições hiperglicêmicas. Para tanto, CTM-MO de ratos diabéticos foram mantidas em meio osteogênico ou adipogênico para diferenciação em OB-DM ou AD-DM, e tratadas com FBM (660 nm; 0,14 J; 20 mW; 0,714 W/cm2 e 5 J/cm2) a cada 72 h. Como controle foram utilizadas OB e AD de animais saudáveis. A diferenciação de OB foi avaliada pela produção de matriz mineralizada (vermelho de alizarina) e a de AD pelo acúmulo de lipídeos (óleo vermelho), aos 17 dias. Os dados foram comparados por One-way ANOVA (p≤0,05).
O DM resultou em diminuição da produção de matriz mineralizada em OB-DM e aumento do acúmulo de lipídios em AD-DM em relação aos controles saudáveis (p=0,008; p = 0,004). Por outro lado, a FBM aumentou a produção de matriz em OB-DM-FBM e diminuiu o acúmulo de lipídios em AD-DM-FBM relação à OB-DM e AD-DM respectivamente (p<0,001; p=0,002). O aumento da diferenciação OB aliado à diminuição da diferenciação AD em células expostas à FBM, poderão contribuir para aplicação de novas terapias no tratamento de alterações do metabolismo ósseo em diabéticos.
(Apoio: FAPESP  N° 19/23350-3)

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PI0390 - Painel Iniciante
Área: 1 - Cirurgia bucomaxilofacial

Otimização do reparo ósseo em fraturas femorais com a fotobiomodulação em ratas com osteoporose experimentalmente induzida
Fonseca-Santos JM, Polo TOB, Momesso GAC, Silva WPP, Barbosa S, Garcia VG, Theodoro LH, Faverani LP
Cirurgia e Diagnóstico - UNIVERSIDADE ESTADUAL PAULISTA - ARAÇATUBA
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da fotobiomodulação (FB) no reparo ósseo de ratas ovariectomizadas submetidas à simulação de fraturas femorais. 32 ratas Wistar, com 6 meses de idade, em que metade dos animais foram submetidos à ovariectomia bilateral (OVX) e a outra metade à cirurgia fictícia de ovariectomia (SHAM), e um período de 90 dias pós-operatórios foram acompanhadas para observar a presença da osteoporose. As ratas foram submetidas à simulação de fratura em um dos fêmures e após foram fixadas com miniplaca e parafusos do sistema 1,5 mm. Assim metade dos grupos SHAM e OVX não foram submetidos à FB (SFB) e a outra metade foram submetidos a FB (CFB) durante 5 minutos. A eutanásia foi realizada aos 60 dias de pós-operatório. As regiões de interesse, inicialmente escaneadas em microtomografia computadorizada (MicroCT). Após este processo, as lâminas foram coradas em vermelho de alizarina e azul de Stevenel para histometria de área de osso neoformado (NBF) no "gap" reparacional e análise do padrão reparacional histológico. Os grupos OVX apresentaram menor volume ósseo, mas com maior qualidade na microarquitetura nas análises de MicroCT. A dinâmica do turnover ósseo evidenciou a neoformação óssea nos grupos CFB. A NBF apresentou valores similares entre os grupos SHAM SFB e OVX CFB e valores significativamente baixos do grupo OVX SFB (p < 0,05).
Em conclusão os resultados são encorajadores para a utilização da FB no ato operatório, o qual otimizou o reparo ósseo de fraturas dos fêmures principalmente em animais com baixa densidade mineral óssea.
(Apoio: FAPs - Fapesp  N° 2018/11496-0  |  FAPs - Fapesp  N° 2019/17072-0  |  FAPs - Fapesp  N° 2016/20297-6)

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