PN0025 - Painel Aspirante
Área: 3 - Controle de infecção / Microbiologia / Imunologia

Efeito da terapia fotodinâmica em nanopartículas poliméricas incorporadas ao curcumin sobre queratinócitos orais
Minhaco VMTR, Tonon CC, Maquera-Huacho PM, Chorilli M, Spolidorio DMP
UNIVERSIDADE ESTADUAL PAULISTA - ARARAQUARA
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

O objetivo deste estudo foi sintetizar nanopartículas poliméricas incorporadas ao curcumin (Cur-NP) e avaliar o efeito citotóxico na terapia fotodinâmica. Cur-NPs foram sintetizadas com poliprolactona e caracterizadas por índice de polidispersão, potencial zeta, microscopia eletrônica de varredura e eficiência de encapsulamento. Queratinócitos orais humanos (NOK Si) foram cultivados em Modified Eagle's Medium (DMEM), e mantidos a 37 °C, CO₂ 5 %. Concentrações entre 0,195 e 200 µg/ml de Cur e Cur-NP, sem e com fotoativação (luz azul, 450 nm), foram testadas nos tempos 3, 4 e 5 minutos (dose: 3,96 J/cm², 5,28 J/cm² e 6,6 J/cm², respectivamente). Clorexidina 0,12% e peróxido de hidrogênio 3% foram utilizados como controles positivos e DMEM como controle negativo. Após os tratamentos, os resultados de viabilidade celular foram avaliados por alamarBlue. A viabilidade celular sem fotoativação, em todos os tempos e concentrações, foi maior que 70%, não apresentando efeito citotóxico. Quando fotoativadas por 3 min, as concentrações menores que 3,125 µg/ml Cur e 200 µg/ml Cur-NP não foram citotóxicas, assim como concentrações abaixo de 1,56 µg/ml de Cur e Cur-NP por 4 min e abaixo de 6,12 µg/ml de Cur e 3,125 µg/ml de Cur-NP por 5 min, quando comparados ao controle negativo (p<0,05).
Cur e Cur-NP quando aplicados em células NOK-Si, não apresentam citotoxicidade em baixas concentrações associados a curto período de tempo de fotossensibilização.
(Apoio: FAPs - Fapesp  N° 2018/10836-2)

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PN0026 - Painel Aspirante
Área: 3 - Controle de infecção / Microbiologia / Imunologia

Efeitos antifúngicos do Atazanavir e Darunavir sobre Candida albicans: Estudo in vitro e in vivo
Fenley JC, Barros PP, Junqueira JC, Rossoni RD
Biociencias e Diagnostico Bucal - UNIVERSIDADE ESTADUAL PAULISTA - SÃO JOSÉ DOS CAMPOS
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

Portadores do Vírus da Imunodeficiência Humana (HIV) são propícios a apresentar candidoses na cavidade bucal. Os Inibidores de Protease do HIV (IP-HIVs) podem interferir na produção enzimática das SAPs de C. albicans e até o presente momento não existem estudos avaliando a atividade antifúngica de IP-HIVs de segunda ou terceira geração. Sendo assim, o objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos do Atazanavir (ATV) e Darunavir (DRV), dois IP-HIVs em uso clínico atual no Brasil, em C. albicans. Foram utilizadas duas cepas clínicas de C. albicans, isoladas de lesões de candidose orofaríngea de pacientes portadores de HIV, para avaliar a ação in vitro das drogas na determinação da concentração inibitória mínima (CIM), morfogênese e formação de biofilme (contagem de células viáveis e quantificação de biomassa). No estudo in vivo, o efeito protetor desses medicamentos foi avaliado na infecção experimental por C. albicans em Galleria mellonella. Os dados foram analisados por teste t, ANOVA e Kaplan-Meier (p<0,05). A CIM para ambos medicamentos foi 512 µg/mL. ATV e DRV reduziram significativamente a filamentação de C. albicans (p=0,0183). Nos biofilmes, a UFC/mL de C. albicans (ATV: 6,81 log ; DRV: 6,27 log) e a biomassa foram significantemente reduzidas. O uso profilário de ATV e DRV em G. mellonella infectadas com C. albicans prolongou em até 40% a sobrevivência das larvas (p=0,0004).
Conclui-se que ATV e DRV apresentaram atividade antifúngica, sendo capaz de inibir o crescimento, a morfogênese, a formação de biofilme de C. albicans e prevenir a candidose em G. mellonella.

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PN0027 - Painel Aspirante
Área: 3 - Cariologia / Tecido Mineralizado

Engenharia de película adquirida por meio de tratamentos com proteínas/peptídeo para a proteção contra a erosão dental
Carvalho TS, Araujo TT, Ventura TMO, Dionizio A, Moraes SM, Marchetto R, Henrique Silva F, Buzalaf MAR
Ciências Biológicas - UNIVERSIDADE DE SÃO PAULO - BAURU
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

Este estudo avaliou in vivo alterações no proteoma da película adquirida do esmalte (PAE) após tratamento com cistatina derivada da cana (CaneCPI-5), hemoglobina humana (Hb), peptídeo derivado da estaterina (StN15) ou sua combinação antes da formação da PAE e subsequente desafio erosivo. Dez voluntários participaram de um protocolo cruzado e triplo-cego. Em cada uma das 5 fases, após a profilaxia, os voluntários bochecharam 1 mL (1min) das seguintes soluções: água deionizada, CaneCPI-5 0,1mg/mL, Hb 1,0mg/mL, StN15 1,88x10-5M ou a combinação de todos os tratamentos. Após a formação da PAE (2h), as proteínas resistentes ao ácido cítrico 1% (10µL, pH 2.5, 10s) foram coletadas e analisadas por nLC-ESI-MS/MS. Os tratamentos com proteínas/peptídeo testados isoladamente, aumentaram muitas proteínas ácido resistentes quando comparados com a combinação, assim como a combinação vs água. Os maiores aumentos foram observados na Submaxillary gland androgen-regulated protein 3B (11x, StN15), Histatin-1 (10x StN15 e 3x, combinação/água), Immunoglobulinas (2x, StN15 e 5x, combinação/água), Hemoglobin subunits (4x, StN15 e 2x, Hb), Lysozyme C e Protein S100-A9 (3x, StN15), Cystatin-B (2x, combinação/água) e Myeloperoxidase (1x, Cane).
Foram observados aumentos em proteínas ácido-resistentes na PAE quando as proteínas/peptídeos isolados foram comparados com a combinação, com destaque para o StN15. Esses resultados abrem caminho para que possam ser desenvolvidos produtos odontológicos, que venham a ser utilizados em ampla escala para o controle da erosão dentária.
(Apoio: FAPESP  N° 2019/16254-8)

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PN0028 - Painel Aspirante
Área: 3 - Controle de infecção / Microbiologia / Imunologia

Epidemiologia da COVID-19 em crianças x Desinfecção de chupetas
Souza VGC, Apolonio ACM
UNIVERSIDADE FEDERAL DE JUIZ DE FORA
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

Dada a repercussão da pandemia causada pelo novo coronavírus em 2019 - COVID-19 (SARS-CoV-2), a prevenção contra a disseminação do vírus é prioritária. Assim, buscou-se relacionar a epidemiologia da doença em crianças com a necessidade da desinfecção de chupetas, por meio de revisão da literatura. Pesquisa em diferentes bases de dados, dos últimos 4 meses (janeiro-abril 2020), utilizando-se as buscas "novel coronavirus and children" e "novel coronavirus and pacifier", recuperou 164 artigos, que após análise restaram 17 que se enquadraram nos critérios de inclusão. Contrariamente ao que se pensava no início do surto, crianças são susceptíveis à doença, mas a maioria (>90%) é assintomática ou tem manifestações clínicas leves. Sendo as ≤3 anos mais susceptíveis às formas severas da doença. O agravante é que nessa idade, as crianças comumente usam chupetas, que estão em contato com mucosa oral e saliva (principal meio de contágio do SARS-CoV-2), além de sofrerem quedas. Portanto, sua correta desinfecção é essencial em tempos de pandemia, apesar de não haver consenso sobre a melhor estratégia de realizá-la.
Considerando a epidemiologia da COVID-19 em crianças potencialmente usuárias de chupeta e a capacidade desta de transmissão do vírus, tanto para as crianças quanto para os cuidadores, a atenção na desinfecção das mesmas deve ser reforçada, visando evitar a propagação da doença.

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PN0029 - Painel Aspirante
Área: 3 - Fisiologia / Bioquimica / Farmacologia

Proteoma salivar: um papel potencial no diagnóstico precoce do câncer de mama
Fernandes LL, Sena I, Lorandi LL, Birbrair A, Heller D
Ppgo - UNIVERSIDADE CRUZEIRO DO SUL
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

Este estudo propõe identificar biomarcadores para o diagnóstico precoce do câncer de mama através da análise do proteoma salivar de camundongos transgênicos C(3)1-TAg que desenvolvem câncer de mama semelhante ao que ocorre em humanos. Coletou-se a saliva de animais C(3)1-TAg de 4 e 8 semanas de idade e seus respectivos controles. Essa idade foi escolhida pelo fato do animal possuir a alteração genética que favorece o câncer de mama, porém na análise histopatológica mamária ainda não há a presença de alterações celulares. A salivação foi induzida por pilocarpina e obtida por micropipeta. A análise do proteoma salivar foi realizada por espectrometria de massa sem marcação. Interessantemente, em análises semiquantitativas do proteoma salivar detectou-se que animais C(3)1-TAg apresentaram maior expressão proteica das vias relacionadas à inflamação, angiogênese e hipóxia, mesmo sem apresentar alteração celular visível na histopatologia. Além disso, análises quantitativas mostraram que esses animais C(3)1-TAg tem uma expressão significativamente maior (p=1.6404, Teste T) de proteínas relacionadas ao catabolismo lipídico, um importante processo de produção de energia para a proliferação de células tumorais.
Dessa forma, nossos resultados mostram que análise proteica da saliva pode ser promissora para identificar alterações celulares presentes nas células tumorais que ainda não foram detectadas pelo método histopatológico clássico.

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PN0030 - Painel Aspirante
Área: 3 - Fisiologia / Bioquimica / Farmacologia

Efeito da sinvastatina sobre S. aureus: evidências de seu mecanismo de ação antimicrobiano
Sousa ITC, Silva KP, Lima SPA, Cogo-Müller K
Ciências Fisiológicas - FACULDADE DE ODONTOLOGIA DE PIRACICABA
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

Este trabalho tem por objetivo iniciar uma investigação sobre o mecanismo de ação antimicrobiano da sinvastatina (SNV) sobre S. aureus, especialmente sobre a via do mevalonato e produção da parede celular bacteriana. Para isto, foram desenvolvidos 3 ensaios: Ensaio de concentração inibitória mínima (CIM) da SNV sobre duas cepas de S. aureus (ATCC 29213 e ATCC 33591) seguindo as recomendações do Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI); Ensaio do efeito da adição de mevalonato em diversas concentrações em cepas tratadas com SNV nas concentrações 2xCIM e CIM (efeito mensurado a partir de espectrofotometria nos tempos 0, 4, 8, 16 e 24h); e Análise da expressão de genes relacionados à produção de peptidoglicano de parede celular (uppP, uppS e murG) e de genes da via do mevalonato (mvaS, mvaK1 e mvak2) por qPCR em resposta a SNV nas concentrações 1/4 e 1/8 CIM. No ensaio de inibição, confirmou-se a ação antimicrobiana da SNV nos valores de CIM 15,65µg/mL e 31,25µg/mL para ATCC 29213 e ATCC 33591, respectivamente. No ensaio do mevalonato, observou-se que a adição de concentrações 200 µM, 500 µM e 1 mM promoveu recuperação parcial de crescimento (p<0,05. ANOVA 2 critérios, Tukey). Para a análise da expressão gênica, não houve interferência significativa da sinvastatina na expressão gênica (p>0,05. ANOVA 1 critério, Tukey).
Diante disto, apesar da necessidade de mais testes para elucidar o mecanismo de ação antimicrobiano da SNV, estes dados comprovam sua ação antimicrobiana e fornecem indícios de que seu mecanismo de ação esteja relacionado à via do mevalonato bacteriana.
(Apoio: FAPs - FAPESP  N° 2018/20593-0  |  CNPq)

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PN0031 - Painel Aspirante
Área: 3 - Fisiologia / Bioquimica / Farmacologia

Efeito da liberação de oxigênio na cicatrização de tecidos moles
Foggiatto A, Clemente-Napimoga JT

Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

Estudos tem sugerido que o aumento na oferta de oxigênio nos tecidos desempenha um papel crucial na cicatrização de feridas, sendo explorado como uma nova modalidade terapêutica, envolvendo múltiplos processos, incluindo a morte de bactérias por oxidação, re-epitelização, angiogênese e síntese de colágeno. Clinicamente, o gel oral Blue®m tem demonstrado acelerar o processo de reparo tecidual, bem como bons resultados de alívio das dores, pois libera uma alta dose de oxigênio natural que possui um efeito positivo no processo de cura do tecido mole da boca. O presente trabalho avaliou o efeito local da liberação de oxigênio em um modelo de ferida cutânea na região tóraco-lombar dorsal de 60 ratos Wistar através de um estudo histomorfométrico. Os animais foram aleatoriamente separados em 2 grupos distintos com 5 animais cada e, após 1, 2, 4, 6, 11 e 14 dias os animais foram eutanasiados para posterior análise. Os resultados demonstraram que o grupo tratado com o gel oral Blue®m apresentou a camada epidérmica mais densa, com processo de re-epitelização e angiogênese. Os resultados obtidos nesse estudo permitem concluir que o gel oral Blue®m demonstrou eficiência no processo cicatricial de feridas cutâneas em ratos devido ao aumento da proliferação de fibroblastos e de fibras colágenas e aparecimento de novos vasos sanguíneos.
Os resultados obtidos nesse estudo sugerem que o gel oralBlue®m potencializou o processo cicatricial de feridas cutâneas em ratos devido ao aumento da proliferação de fibroblastos e de fibras colágenas e aparecimento de novos vasos sanguíneos.

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PN0032 - Painel Aspirante
Área: 3 - Controle de infecção / Microbiologia / Imunologia

Citotoxicidade de extratos de diferentes espécies de Cryptocarya (Lauraceae)
Ribas BR, Zoccolotti JO, Tasso CO, Scabelo L, Jorge JH
Materiais Odontológicos e Prótese - UNIVERSIDADE ESTADUAL PAULISTA - ARARAQUARA
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

O objetivo do estudo foi avaliar a citotoxicidade de extratos de espécies de Cryptocarya, sobre células epiteliais (NOK). Utilizando-se as Concentrações Inibitórias Mínimas (CIMs) para as células planctônicas e biofilme de C. albicans. Para análise da citotoxicidade, 105 células/mL, foram colocados em cada compartimento de uma placa de 96 orifícios, incubada em estufa com 5% de CO2, a 37ºC por 24 horas. Posteriormente, o meio de cultura foi desprezado, permanecendo as células aderidas no fundo da placa. Foram adicionados 100 µL de meio de cultura novo contendo a solução da planta medicinal, em diferentes concentrações, e 10 µL de solução de AlamarBlue®. A fluorescência dos extratos (n=12) foi medida usando Fluoroskan Ascent (560 nm e 590 nm) após 6, 12 e 24 horas. Os resultados foram submetidos aos testes ANOVA mista e Tukey (α=0,05). Os resultados mostraram que houve diferença estatística significativa entre os grupos, em todos os tempos (p˂0,05) e que todos os extratos diminuíram a viabilidade celular em comparação com o grupo controle. Quando os resultados foram convertidos em porcentagem e comparados com o grupo controle, verificou-se que os extratos, na CIM para biofilme, foram considerados intensamente citotóxico, em todos os tempos. Nas CIMs para as células planctônicas, os extratos variaram de não citotóxicos a intensamente citotóxico. Para todos os grupos, a porcentagem de células viáveis diminuiu com o tempo.
Assim, podemos concluir que os extratos obtidos das folhas e frutos de C. Moschata e C. Mandioccana reduziram a viabilidade das células epiteliais.
(Apoio: PIBIC/REITORIA  N° 46203)

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PN0033 - Painel Aspirante
Área: 3 - Cariologia / Tecido Mineralizado

Verniz fluoretado contendo trimetafosfato de sódio nanoparticulado reduz a desmineralização do esmalte dental in vitro
Báez-Quintero LC, Delbem ACB, Alves KDB, Paiva MF, Silva IF, Cunha RF, Pessan JP
Odontología Preventiva e Restauradora - UNIVERSIDADE ESTADUAL PAULISTA - ARAÇATUBA
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

Avaliou-se o efeito de vernizes fluoretados (F) suplementados com nanopartículas de Trimetafosfato de Sódio (TMP) sobre a desmineralização do esmalte dental in vitro. Blocos de esmalte dental bovino (n=48) foram selecionados por meio de Dureza de Superfície (DS) e aleatoriamente divididos em 4 grupos experimentais (n=12/grupo): Placebo (sem F ou TMP), 5% NaF, 5% NaF/5% TMP microparticulado e 5% NaF/5% TMP nanoparticulado. Os blocos receberam uma única aplicação dos vernizes e foram imersos em solução remineralizadora (RE) por 6 h. Após a remoção dos vernizes, os blocos foram transferidos para uma solução desmineralizadora (DES) por 6 h e em seguida para uma solução RE por 18 h. Este ciclo foi repetido por 5 dias, seguido de imersão em uma solução RE nova por 2 dias adicionais. Após dos tratamentos, realizou-se análise de DS final e análise de dureza em secção longitudinal (ΔKHN). Os dados foram submetidos a ANOVA a 1 critério, seguida do teste de Student-Newman-Keuls (p<0,05). A menor perda de DS foi observada para o grupo contendo TMP nanoparticulado (-22,5%), seguido do TMP microparticulado (-28,3%), 5% NaF (-44,0%) e Placebo (-66,2%), com diferenças significativas entre os grupos (p<0,05). Quanto a ΔKHN o mesmo padrão foi observado, sendo o menor valor para o grupo com TMP nanoparticulado (1821,9) e o maior para o Placebo (4084,4), com diferenças estatisticamente significativas entre todos grupos (p<0,05).
Conclui-se que a adição de nanopartículas de TMP a um verniz F convencional reduz significativamente a desmineralização do esmalte dental bovino in vitro.
(Apoio: FAPs - FAPESP  N° 2018/25860-6  |  CAPES  N° 88887.374376/2019-00)

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PN0034 - Painel Aspirante
Área: 3 - Cariologia / Tecido Mineralizado

Potencial in situ do laser de CO₂ 9,3 μm, associado ou não à solução de AmF/NaF/SnCl₂, em prevenir/controlar lesão de erosão em esmalte dental
Tavares JP, Silva CV, Engel Y, Rechmann P, Freitas PM
Dentística - UNIVERSIDADE DE SÃO PAULO - SÃO PAULO
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

Este estudo in situ, cego, cruzado e de boca dividida avaliou o efeito do laser de CO₂ (9,3 μm), associado ou não à solução de AmF/NaF/SnCl₂, na prevenção (Etapa I: amostras hígidas) e controle (Etapa II: amostras pré-erodidas) da erosão em esmalte dental humano. As etapas, de 10 dias cada, foram divididas em duas fases: Fase I- não uso da solução; Fase II- uso da solução. Dividiu-se, randomicamente, 192 amostras em 4 grupos (n=12): C - sem tratamento; F - solução de AmF/NaF/SnCl2; L - laser de CO₂ (9,3 μm, 0,69 W, 100 Hz, 2,21 J/cm²); L+F - laser de CO₂ + solução de AmF/NaF/SnCl₂. Doze voluntários utilizaram um dispositivo removível intraoral contendo 4 amostras/fase, submetidas ao desafio erosivo. Realizou-se avaliação em perfilometria óptica (n=12) e Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV) (n=3). Etapa I (prevenção): pelos testes ANOVA 1-fator e de Tukey, observou-se que L+F apresentou melhores resultados, mas não se diferenciou de L. Etapa II (controle): pelos testes ANOVA 2- fatores para medidas repetidas e de Tukey, notou-se que nenhum dos grupos revelaram diferença significativa após formação da lesão inicial; após 5 dias, L+F apresentou menor perda tecidual, todavia não se diferindo de L; L+F não revelou diferença significativa entre lesão inicial e após 5 dias. Em MEV, L e L+F apresentaram superfície com padrão craquelado, antes e depois da ciclagem.
O laser de CO₂ apresentou potencial em prevenir e controlar erosão em esmalte, sendo maior quando associado à solução de AmF/NaF/SnCl₂.
(Apoio: CNPq  N° 3.141.279)

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