HA014 - Hatton
Área: 8 - Periodontia

Epigenetic regulation in human periodontal ligament cells with distinct osteogenic potential: Genome-Wide analysis
Assis RIF, Racca F, Ferreira RS, Nociti-Júnior FH, Ruiz KGS, Silva RA, Wiench M, Andia DC
Periodontia e Protese - FACULDADE DE ODONTOLOGIA DE PIRACICABA
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

Human periodontal ligament cells (PDLCs) can show distinct osteogenic potential, limiting their clinical applications. Through genomic approaches, our goal is to identify markers to assess osteogenic potential. PDLCs with high (h-) and low (l-) osteogenic potential were cultivated in control medium or osteogenic medium for 10 days, in vitro. DNA, chromatin and RNA were submitted to methylome, Assay for transposase accessible chromatin (ATAC) and RNA protocols, followed by next generation sequencing and bioinformatics analysis. After middle osteogenesis, results showed more differentially methylated probes (hyper/hypo) in l-PDLCs than in h- (74 x 41) with common methylated regions at gene body. There were more regions with accessible chromatin in the l-PDLCs, mainly in genes related to osteogenesis (RUNX2 l-43 x h-8; SP7 l-5 x h-1), transcription factors (Gli l-70 x h-17, Rab23) and pluripotency (OCT4 l-4 x h-0). The regulatory regions associated with cell identity (superenhancers) activated in l- were distinct from h-PDLCs. RNA-seq confirmed a different transcriptional pattern.
We unravel the epigenetic and transcriptional patterns of PDLCs with distinct osteogenic potential, showing distinct epigenetic regulation and transcriptional background, and this could affect gene markers and therefore, the clinical application outcome.
(Apoio: FAPs - FAPESP   N° 2019/01727-8  |  FAPs - FAPESP   N° 2017/12158-9  |  FAPs - FAPESP   N° 2017/07944-5)

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HA015 - Hatton
Área: 8 - Periodontia

Interactions between hemodialysis vintage with xerostomia and tooth loss on oral health-related quality of life
Oliveira LM, Schöffer C, Santi SS, Antoniazzi RP, Zanatta FB
Estomatologia - UNIVERSIDADE FEDERAL DE SANTA MARIA
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

The aim of the present cross-sectional study was to evaluate whether tooth loss and xerostomia are independently associated with oral health-related quality of life (OHRQoL) in individuals with end-stage renal disease (ESRD) and whether hemodialysis vintage (HV) modifies the effect of these associations. One hundred eighty adults with ESRD were assessed by calibrated examiners. Oral examinations were performed for untreated dental caries, periodontitis, tooth loss (≤ 8 or > 8 teeth) and xerostomia (absent or present). HV was determined using hospital records and categorized as ≤ 12, 13-72 or ≥ 73 months. OHRQoL was assessed using the simplified version of the Oral Health Impact Profile (OHIP14) questionnaire. Adjusted multivariate negative binomial regression analysis was used to calculate the rate ratio (RR) of OHIP14 scores according to the exposures of interest and interactions with HV. In the adjusted model, xerostomia and tooth loss were significantly associated with poorer OHRQoL. Moreover, longer HV (≥ 73 months) negatively modified the effect of the associations between the exposures [xerostomia (RR = 2.96; 95% CI: 1.48 to 5.90); tooth loss (RR = 4.13; 95% CI: 2.00 to 8.51)] and outcome.
Xerostomia and tooth loss exert an influence on OHRQoL in individuals with end-stage renal disease, with a greater impact found among those on hemodialysis for a longer period of time. Policy makers should consider the greater impact of oral conditions on OHRQoL in extended HV by giving additional priority to patients on long-term pretransplant hemodialysis.
(Apoio: CAPES  N° 001)

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HA016 - Hatton
Área: 8 - Periodontia

Analysis of the oral biofilm diversity and protein profile of saliva and acquired enamel pellicle of individuals with periodontitis
Amado PPP, Kawamoto D, Saraiva L, Siqueira WL, Mayer MPA
Microbiologia - UNIVERSIDADE DE SÃO PAULO
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

The etiology of Grade C/molar-incisor pattern periodontitis (GC/MIP), Localized Aggressive Periodontits, is poorly understood. We determinate the oral and gut microbiomes, inflammatory mediators and whole saliva (WS) and acquired enamel pellicle (AEP) proteomes of Afro-descendants with GC/MIP and their age/race/gender-matched non-affected controls (n=7). Biofilms from supra/subgingival sites (OB) and feces were analyzed by 16S rRNA sequencing. WS and AEP proteomes were determined by LC-ESI-MS/MS. Cytokines/chemokines WS and WS proteolytic activity were evaluated. GC/MIP supragingival biofilm presented greater abundance of opportunistic bacteria. Synergistetes and Spirochaetae were increased whereas Actinobacteria was reduced in GC/MIP OB compared to controls. GC/MIP oral microbiome presented reduction in commensals and enrichment in A. actinomycetemcomitans and sulfidogenic bacteria (SB). SB was more abundant in fecal microbiome of GC/MIP. Increase of CCL2/CCL25 and decrease of CCL17/CCL27 were observed in GC/MIP. AEP proteins such as ALMS1 and Cystatin-S, and WS proteins such as alpha-enolase, profilin-1, dystonin, A2ML1, alpha-actinin-4 and IGHA1 were differentially detected in the studied groups. WS proteolytic activity was more pronounced in GC/MIP than in controls.
Dysbiosis in GC/MIP is not restricted to periodontitis sites, suggesting that antimicrobial therapies should address the whole mouth and the gut. WS and AEP proteins, and chemokines have potential to be used as biomarkers of GC/MIP.
(Apoio: FAPESP  N° 2015/00259-0)

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HA017 - Hatton
Área: 10 - Implantodontia básica e biomateriais

Effect of topical PTH 1-34 added to bioglass on peri-implant defect in orchiectomized rats
Gomes-Ferreira PHS, Micheletti C, Frigério PB, Monteiro NG, De-Souza-batista FR, Lisboa Filho PN, Grandfield K, Okamoto R
Cirurgia e Clínica Integrada - UNIVERSIDADE ESTADUAL PAULISTA - ARAÇATUBA
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

The objective of this work was to evaluate a bioglass functionalized with parathyroid hormone (PTH 1-34) using the sonochemistry technique in peri-implant defects in orchiectomized rats. 96 rats were divided into two groups, i.e. SHAM - control surgery and ORQ - orchiectomy. Each group was subdivided into three sub-groups: CLOT (pre-implant defect, without bioglass); BG (pre-implant defect and bioglass); BGPTH (pre-implant defect and bioglass functionalized with topical PTH 1-34). Each animal received an implant in the tibial metaphysis. Euthanasia occurred at 30 and 60 days after implant placement. MicroCT, laser confocal microscopy, biomechanics, immunohistochemistry, PCR-RT, and electron microscopyanalyses (energy dispersive x-ray spectroscopy, scanning electron microscopy and transmission electron microscopy (TEM)) were performed. As suggested by microtomographic parameters, biomaterial with or without PTH 1-34 showed improvement in bone repair. Analysis of fluorochromes and biomechanics indicated that the functionalized biomaterial increased bone regeneration in the ORQ group to the same level as the SHAM group without PTH 1-34. Immunohistochemistry and PCR analyses show positive changes in groups with PTH 1-34. Nanoscale imaging with TEM suggested the presence of a greater dissolution area of the bioglass and greater organization of collagen fibers in the ORQ BGPTH group.
Overall, the functionalization of bioglass with PTH 1-34 showed improvement in bone regeneration and resulted to be even more effective in the osteoporotic animals.
(Apoio: FAPs - FAPESP  N° 2017/08187-3)

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HA018 - Hatton
Área: 10 - Implantodontia - clínica protética

Stress distribution and micro-gap formation at the abutment-implant interface: a three-dimensional finite element analysis
Tonin BSH, He Y, Ye N, Chew HP, Fok A
Odontologia Restauradora - UNIVERSIDADE DE SÃO PAULO - RIBEIRÃO PRETO
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

This study aims to investigate the stress distribution in the prosthetic screw and the formation of micro-gaps at the implant-abutment interface of conical connections with titanium (Ti) and yttrium-stabilized zirconium (Y-TZP) abutments. Three-dimensional finite models of the above implant-abutment connections were created. The analyses were conducted using a screw torque of 20 N.cm and an oblique load at 30º from 10 to 100 N at intervals of 10 N, and from 120 to 280 N at intervals of 20 N. The stress distribution, the micro-gap formation process, and the critical load for bridging of the internal implant space, and the size of the micro-gaps were evaluated. The models showed similar patterns of von Mises stress which was mainly concentrated at the top and in the middle of the screw. For all the models, the implant-abutment contact area decreased with increasing load. Above 140 N, bridging of the internal implant space was found when over 70% of the interfacial area was opened. Under 280 N, more than 90% of the interface had a gap larger than 30 mm.
Overall, this study does not indicate any obvious advantage of Ti or Y-TZP abutments over each other. Although the simulated micro-gaps and bridging of the internal implant space can explain the presence of bacteria detected clinically inside implants, the relationship between bacterial invasion and micro-gaps needs further research.
(Apoio: CAPES  N° 88881-187982/2018-01)

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PN0001 - Painel Aspirante
Área: 3 - Cariologia / Tecido Mineralizado

Efeito do TiF₄, após tratamento com proantocianidina, na progressão da erosão da dentina com ou sem matriz orgânica desmineralizada
Vertuan M, Souza BM, Mosquim V, Silva CV, Freitas PM, Rios D, Magalhães AC, Honório HM
Ciências Biológicas - UNIVERSIDADE DE SÃO PAULO - BAURU
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

Este estudo avaliou o efeito do verniz de TiF₄, após tratamento com proantocianidina/clorexidina, na progressão do desgaste erosivo da dentina, na presença ou ausência da matriz orgânica desmineralizada (MOD). Para tal, 360 amostras de dentina foram erodidas (ácido cítrico 0,1%, 30 min). Em metade das amostras (n=180) removeu-se a MOD com colagenase por 4 dias. As amostras foram divididas em 24 grupos (n=15) de acordo com os fatores: 1- Com ou sem MOD; 2- Pré-tratamento com gel de clorexidina 0,012%, gel de proantocianidina 10% ou sem tratamento por 60 s visando prevenir a degradação da MOD; 3- Tratamento final com verniz de TiF₄, verniz de NaF, verniz placebo ou sem tratamento por 6 h. A ciclagem de pH foi realizada por 5 dias com ácido cítrico (4x90 s/dia) intercalado com saliva artificial. O desgaste foi avaliado por perfilômetria (ANOVA a três critérios /teste de Tukey). O desgaste foi menor na presença que na ausência da MOD (com: 3,54±3,01 µm e sem: 8,00±3,97 µm, p<0,01). O pré-tratamento não reduziu a progressão do desgaste independentemente da presença da MOD (p=0,63). O tratamento final com verniz de TiF₄ (com MOD: 6,2±4,4 µm /sem MOD: 7,4±3,4 µm; p<0,01) foi eficaz na redução da progressão do desgaste quando comparado ao controle (com MOD: 6,8±3,7µm /sem MOD: 10,9±3,4 µm; p<0,01), independentemente da MOD e do pré-tratamento.
A MOD assim como o TiF₄ têm papel protetor na progressão do desgaste erosivo da dentina.
(Apoio: CAPES  N° 001)

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PN0002 - Painel Aspirante
Área: 3 - Cariologia / Tecido Mineralizado

Efeito de soluções contendo extratos de plantas sobre a sobrevivência de bactérias associadas à cárie dentária
Braga AS, Melo FPSR, Saldanha LL, Dokkedal AL, Conrads G, Magalhães AC, Esteves Oliveira M
Ciências Biológicas - UNIVERSIDADE DE SÃO PAULO - BAURU
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

O objetivo foi avaliar o efeito de soluções contendo extratos de plantas sobre a sobrevivência de bactérias cariogênicas. Biofilme microcosmo foi produzido a partir da saliva de 10 doadores sobre esmalte bovino (n=36) e cultivado por 5 dias, utilizando saliva de McBain (0,2% sacarose), a 37º C e sob anaerobiose. A partir do 2º dia, os tratamentos foram aplicados (1x60s/dia): Vochysia tucanorum Mart (folha, 10 mg/mL); Myrcia bella Cambess (folha, 5 mg/mL); Matricaria chamomilla L. (flor, 80 mg/mL); Malva sylvestris, fluoreto e xilitol (Malvatricin Plus^®); 0,12% Clorexidina-CHX (PerioGard^®) e PBS (controle negativo). O pH do biofilme foi medido diariamente. Realizou-se q-PCR para Streptococcus mutans e Lactobacillus spp. Os dados foram comparados por Kruskal-Wallis/Dunn e ANOVA a dois critérios/ Bonferroni. O pH do biofilme diminuiu em todos os grupos; somente a CHX restabeleceu o pH inicial (> 5,5). CHX também causou completa eliminação de Lactobacillus spp.; já M. chamomilla (1,97E+08±1,75E+08), V. tucanorum (1,65E+08±1,26E+08) e Malvatricin Plus^® (2,39E+07±3,74E+07) não diferiram entre si, enquanto que M. bella aumentou significativamente o número deste gênero bacteriano (4,78E+08±1,58E+08, p=0,0002). Com exceção da CHX, nenhum tratamento diferiu significativamente do PBS. Em relação a S. mutans, os extratos não diferiram significativamente do PBS (2,15E+06 ± 3,97E+06, p>0,05), enquanto houve redução desta espécie para Malvatricin Plus^® e CHX.
Os extratos não comerciais foram ineficazes contra microrganismos cariogênicos.
(Apoio: FAPs - FAPESP  N° 2017/00556-0  |  FAPs - FAPESP  N° 2017/17249-2  |  FAPs - FAPESP  N° 2018/26506-1)

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PN0003 - Painel Aspirante
Área: 3 - Controle de infecção / Microbiologia / Imunologia

Identificação de Candida spp. em portadores do virus HIV com estomatite relacionado a próteses totais
Mendes FSF, Silva-Lovato CH, Paranhos HFO
Materiais Dentários e Prótese - UNIVERSIDADE DE SÃO PAULO - RIBEIRÃO PRETO
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

Este estudo coletou dados de prontuário, realizou exame clínico e avaliou o biofilme protético de 10 pacientes usuários de próteses totais, portadores do vírus HIV e em tratamento com terapia antirretroviral (TARV). O biofilme foi avaliado por meio da quantificação e identificação de cepas de Candida spp.. As próteses superiores foram retiradas, enxaguadas em água, transferidas para recipiente com 150 mL de PBS e submetidas à agitação em cuba ultrassônica (5 minutos). Após retirada da prótese, o conteúdo obtido foi transferido para tubo estéril, o qual foi armazenado em refrigeração e centrifugado por 5 minutos. Após descarte do PBS, o pellet foi diluído (10⁰ a 10^-3) e semeado em placas com meio cromogênico (CHROMagarTM Candida). Após incubação (37º C/ 48h) as cepas foram identificadas segundo a cor adquirida por suas colônias. Os resultados mostraram uma amostra de 7 mulheres (70%) e 3 homens (30%), com idades entre 45 e 72 anos (média 62,3 anos), carga viral média de 536 cópias/mL e contagem de células T CD4+>200/mm³. Foram diagnosticados 7 casos de candidíase eritematosa e 3 de candidíase pseudomembranosa. Foram isoladas 16 cepas de Candida spp., sendo 7 Candida albicans (43,5%), 6 Candida tropicalis (37,5%), 2 Candida krusei (12,5%) e 1 Candida glabrata (6,25%).
Conclui-se que a maioria dos pacientes apresentaram a forma eritematosa da infecção e que Candida albicans foi e a cepa mais incidente, seguida pela Candida tropicalis, sendo tais dados importantes para o entendimento da infecção por Candida spp. e da conduta terapêutica em pacientes com fatores predisponentes
(Apoio: FAPESP  N° 2019/10299-0)

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PN0004 - Painel Aspirante
Área: 3 - Cariologia / Tecido Mineralizado

Escore gravidade do instrumento CAST para avaliação da cárie dentária em adolescentes de 11 a 14 anos de idade
Ribeiro CS, Rodrigues HB, Pinheiro SAA, Guaré RO, Leal SC, Diniz MB
UNIVERSIDADE CRUZEIRO DO SUL
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

O objetivo do estudo foi, por meio do escore CAST gravidade, classificar um grupo de adolescentes entre 11 e 14 anos de idade quanto ao grau de acometimento da doença cárie em leve, moderado e severo. Foram avaliados 439 adolescentes, com média de idade 12,5 ± 1,1, ambos os sexos, matriculados em escolas municipais de Patos-PB. O instrumento CAST (Caries Assessment Spectrum and Treatment) foi utilizado para avaliar lesões de cárie em esmalte (CAST 3), em dentina (CAST 4-7) e perda dentária por cárie (CAST 8) por dois examinadores calibrados (Kappa = 0,90). O escore CAST gravidade foi determinado pela fórmula (F): 0,25*CAST3 + 1*CAST4 + 2*CAST5 + 4*CAST6 + 5*CAST7 + 6*CAST8. Empregou-se o teste Qui-quadrado para análise dos dados (α=5%). Da amostra, 14,5% dos adolescentes eram saudáveis (CAST 0-2). A média do escore gravidade foi de 4,6 ± 5,4 (mediana = 2,5). Para a categorização das crianças, o escore gravidade foi agrupado em tercis (33%-66%), sendo 34,2% classificadas em nível leve da doença (0-1,00), 31,9% em nível moderado (1,00-4,77) e 33,9% em nível severo (>4,77), sem diferença significativa (p=0,8128). Verificou-se ausência de associação significativa entre escore CAST gravidade e série escolar (p=0,2609), idade (p = 0,9111), sexo (p=0,1819) e raça (p=0,6255).
Conclui-se que o escore gravidade CAST permitiu determinar a severidade da doença cárie nos adolescentes de 11 a 14 anos e que a condição de saúde bucal da maioria deles é precária (graus moderado e severo).
(Apoio: CAPES)

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PN0005 - Painel Aspirante
Área: 3 - Controle de infecção / Microbiologia / Imunologia

Susceptibilidade Reduzida ao Diamino Fluoreto de Prata e a Clorexidina na Microbiota Cariogênica
Piovesan ETA, Maia LJ, Martins VP
Odontologia - UNIVERSIDADE DE BRASÍLIA
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

O objetivo do estudo foi avaliar a susceptibilidade de bactérias isoladas de amostras de dentina de pacientes submetidos a 3 diferentes agentes antimicrobianos: clorexidina 2% (CHX), diamino fluoreto de prata (SDF) 30% e SDF 38% com iodeto de potássio (KI). Foram selecionadas 40 crianças apresentando lesão cariosa em molares decíduos. Após as intervenções, colônias bacterianas que cresceram em meio de cultura Mitis Salivarius com Bacitracina (MSB) foram cultivadas em Brain Heart Infusion (BHI). As Concentrações Inibitórias Mínimas (CIMs) dos agentes atimicrobianos foram determinadas in vitro e comparadas às linhagens de referência Streptococcus mutans (ATCC 25175) e Streptococcus sobrinus (ATCC 27607). O rDNA 16S dos isolados clínicos foram amplificados por PCR e sequenciados para confirmação da espécie. Os isolados clínicos apresentaram menor sensibilidade ao SDF e a CHX comparado às linhagens de referência S. mutans e S. sobrinus . A associação de KI ao SDF teve um efeito negativo para a atividade antimicrobiana, reduzindo sua sensibilidade nas linhagens referência e principalmente nas bactérias isoladas de pacientes.
Os isolados clínicos apresentaram sensibilidade reduzida ao CHX quando comparados ao SDF e SDF + KI. Apesar disso, a associação de KI com SDF possivelmente compromete seu efeito antibacteriano. Ambos os tratamentos foram mais eficazes nas cepas de referência em comparação com as cepas clínicas. Isso enfatiza a cautela com o uso de anti-sépticos e o desenvolvimento de resistência por microrganismos associados à doença no microbioma oral.

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