Atividade antimicrobiana da biguanida de polihexametileno (PHMB) sobre biofilmes microcosmos salivares
Mendez DAC, Carvalho CG, Santos PSS, Cruvinel T
Odontopediatria, Ortodontia e Saúde Cole - UNIVERSIDADE DE SÃO PAULO - BAURU
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse
Objetivou-se avaliar e comparar o efeito antimicrobiano da solução de biguanida de polihexametileno (PHMB) com o digluconato de clorexidina (CHX) sobre a viabilidade de biofilmes de microcosmos de saliva. Amostras de saliva de três adultos foram usadas para obter um pool microbiológico para o crescimento dos biofilmes. Os biofilmes cresceram em meio McBain modificado com sacarose a 0,2% por 5 dias, com renovação do meio a cada 24 h. As amostras foram divididas em: a) digluconato de clorexidina (0,06%), b) digluconato de clorexidina (0,12%), c) polihexanida (0,1%), d) polihexanida (0,2%) e e) sem tratamento. Ambas as substâncias foram testadas considerando o efeito da substantividade. Foram avaliadas: viabilidade do biofilme pela contagem de unidades formadoras de colônias, metabolismo pelo ensaio de rezasurina e vitalidade de biofilme intacto pela microscopia confocal de varredura a laser. A análise estatística foi realizada pelos testes de Kruskal Wallis e post-hoc de Dunn (P<0,05). Os estreptococos mutans e os lactobacilos foram reduzidos por ambos antimicrobianos no teste imediato mas apenas a CHX em ambas concentrações reduziu os lactobacilos no mediato. O metabolismo foi reduzido apenas com a CHX 0,06 e 0,12 tanto em imediato como mediato. A vitalidade do biofilme foi reduzida apenas com a CHX 0,12 na análise mediata, porém a PHMB reduziu o biovolume e a matriz extracelular no teste mediado. Portanto, a PHMB não foi capaz de superar o efeito antimicrobiano da clorexidina sobre a ecologia de biofilmes de microcosmos salivares.PN1313 - Painel Aspirante
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3 - Controle de infecção / Microbiologia / Imunologia
Modelo in vitro de biofilme duo-espécie de Candida albicans e Enterococcus faecalis para estudo de infecções endodônticas
Fiallos NM, Maia DCBSC, Aguiar ALR, Silva BN, Fiallos ACM, Cordeiro RA
Patologia e Medicina Legal - UNIVERSIDADE FEDERAL DO CEARÁ
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse
O objetivo deste trabalho é descrever um modelo in vitro para o estudo de infecções endodônticas com biofilme duo-espécie de Candida albicans e Enterococcus faecalis e avaliar sua susceptibilidade a antimicrobianos. Para formação de biofilme, E. faecalis ATCC 29212 e C. albicans ATCC 10231 foram cultivadas em caldo BHI e caldo Yeast Nitrogen Base 5% dextrose, respectivamente, a 37 °C por 18 h. As culturas foram concentradas por centrifugação e dos precipitados obtidos foram preparadas suspensões em BHI com densidade celular de 1.5 × 108 células/mL para E. faecalis e 1.0 × 106 células/mL para C. albicans, que foram então misturadas na proporção 1:1e incubadas em microaerofilia a 35°C por 48h, com renovação diária do meio. Após 48h, os grupos foram tratados com Anfotericina 2 μg/mL ou Vancomicina 32 μg/mL por 24h e então analisados por ensaios de Cristal Violeta, contagem de unidades formadoras de colônia e Microscopia Confocal a Laser. Os resultados foram avaliados por meio de ANOVA e Tukey's multiple comparison post-test. Um aumento significante da biomassa e redução das unidades formadoras de colônia de ambas as espécies foi observado após tratamento com Vancomicina. Uma redução significante das unidades formadoras de colônia de C. albicans e aumento nas de E. faecalis foi observado após o tratamento com Anfotericina. As duas drogas reduziram significantemente o biovolume e espessura do biofilme duo-espécie. Concluímos que antimicrobianos com espectro de ação diferentes podem induzir resposta complexa em biofilme de duo-espécie de C. albicans e E. faecalis. (Apoio: funcap)PN1314 - Painel Aspirante
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3 - Fisiologia / Bioquimica / Farmacologia
Desenvolvimento de enxaguatório bucal usando nanopartículas do extrato da borra da própolis vermelha de Alagoas
Queiroga DEU, De Carvalho Silva LT, Oliveira LMM, Araújo JCM, Moreira MSA, Nascimento TG, Ferreira SMS, Panjwani CMBRG
Pós Graduação Strictsensu - CENTRO DE ESTUDOS SUPERIORES DE MACEIÓ
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse
O objetivo deste trabalho foi desenvolver um enxaguatório bucal usando nanopartículas do extrato da Borra da Própolis Vermelha de Alagoas (BPVAL) e avaliar seu potencial antioxidante. Foram preparadas nanopartículas poliméricas carregadas com extrato da BPVAL. Essas nanopartículas foram incorporadas em enxaguatório bucal (ENX-NBPVAL). Foi realizado o ensaio de determinação de marcadores da Própolis Vermelha (PV), identificando os isoflavonoides presentes no extrato da BPVAL, nas Nanopartículas do Extrato da Borra da Própolis Vermelha de Alagoas (NBPVAL) e no enxaguatório bucal, utilizando cromatografia líquida de alta performance acoplada ao detector de arranjo de diodos (HPLC-DAD). A atividade antioxidante foi realizada pelo ensaio de sequestro do radical livre DPPH˙ do extrato da BPVAL foi comparada com as NBPVAL e o ENX-NBPVAL em três diferentes concentrações 50 µg/mL, 75 µg/mL e 150 µg/mL. Os resultados do HPLC demonstraram a determinação dos compostos fenólicos: Daidzeína, liquiritigenina, pinobanksina, isoliquiritigenina, formononetina, pinocembrina e biochanina em todas as amostras estudadas. As amostras formuladas a partir da BPVAL apresentaram atividade antioxidante demonstrando que não houve diferença significativa entre elas (p < 0,05). O ENX-NBPVAL, apresenta atividade antioxidante e marcadores da PV identificados através do (HPLC-DAD), sugerindo sua aplicabilidade na área odontológica. (Apoio: FAPEAL N° 60030 001356/2018)PN1316 - Painel Aspirante
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3 - Controle de infecção / Microbiologia / Imunologia
Anadenanthera colubrina: efeitos anti-Candida, antibiofilme e antiproteolítico in vitro
Silva JPR, Maia CMA, Pasetto S, Godwin WC, Nonaka CFW, Murata RM, Costa EMMB
Odontologia - UNIVERSIDADE ESTADUAL DA PARAÍBA
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse
Avaliar in vitro os efeitos anti-Candida, antibiofilme e antiproteolítico do extrato de Anadenanthera colubrina. A atividade antifúngica foi avaliada pelo método de microdiluição em caldo contra C. albicans ATCC® 90028, C. albicans ATCC® MYA-2876, C. glabrata ATCC® MYA-275, C. tropicalis ATCC® MYA-750 e C. dubliniensis ATCC® MYA-646. O efeito antibiofilme foi avaliado em biofilme maduro de C. albicans e quantificado por UFC/mL/g de peso seco do biofilme. As atividades enzimáticas da proteinase e da fosfolipase foram avaliadas pelos ensaios da azocaseína e da fosfatidilcolina, respectivamente. A expressão gênica das enzimas SAP-1 e PLB-1 foi analisada por RT-PCR. O extrato apresentou efeito fungistático com CIM <15,62 µg/mL sobre as linhagens testadas. O extrato na concentração de 312,4 µg/mL (20 x 15,62 µg/mL) reduziu significativamente a carga fúngica do biofilme de C. albicans (p<0,05), expressa em UFC/ml/g de peso seco do biofilme, bem como a atividade enzimática da proteinase e fosfolipase. A expressão gênica de SAP-1 e PLB-1 secretadas por C. albicans foi infrarregulada (p<0,05), após o tratamento com o extrato de A. colubrina na concentração de 33,28 µg/mL. O extrato de A. colubrina apresentou atividade antifúngica, antibiofilme e antiproteolítica. Considerando a importância destes fatores de virulência na patogenicidade da C. albicans, a A. colubrina pode sinalizar uma fonte promissora no tratamento da candidíase oral. (Apoio: National Institutes of Health - NIH N° UNC/CFAR P30AI50410 | Funds from ECU, Division of Research, Economic Development & Engagement | CAPES N° 47/2017)PN1317 - Painel Aspirante
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3 - Controle de infecção / Microbiologia / Imunologia
Anadenanthera colubrina: regulação in vitro da resposta imune na interação Candida albicans-Hospedeiro
Campos LT, Maia CMA, Pasetto S, Godwin WC, Nonaka CFW, Costa EMMB, Murata RM
Odontologia - UNIVERSIDADE ESTADUAL DA PARAÍBA
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse
Avaliar in vitro os efeitos do extrato da casca de A. colubrina na regulação da resposta imune de fibroblastos gengivais humanos (FGH) infectados por Candida albicans. Inicialmente, determinou-se a citotoxicidade do extrato em FGH pelo método fluorométrico de rezasurina. A interação Candida-hospedeiro foi analisada em um modelo de co-cultura, tratado com o extrato de A. colubrina, utilizando para leitura a microscopia eletrônica de varredura (MEV) e a microscopia de fluorescência. A expressão gênica das citocinas inflamatórias do hospedeiro (IL-6, IL-8, IL-1β, IL-10) foi explorada por RT-PCR, e a secreção das citocinas foi analisada por Luminex. O extrato manteve a viabilidade celular superior a 70% em concentrações de até 250 µg / mL (LD 50 = 423,3 µg / mL). No modelo de co-cultura, o extrato de A. colubrina proporcionou redução substancial no crescimento de C. albicans, produziu desestruturação da morfologia das hifas e toxicidade mínima nos fibroblastos gengivais. A resposta imune do hospedeiro tratado com o extrato foi modulada por uma diminuição significativa na secreção das citocinas pró-inflamatórias IL-6 e IL-8. O extrato de A. colubrina apresenta baixa citotoxicidade em fibroblastos gengivais humanos e modula a resposta imune diminuindo a secreção de citocinas pró-inflamatórias. (Apoio: CAPES N° PDSE-EDITAL 47/2017 | NIH N° P30AI50410 | ECU)PN1318 - Painel Aspirante
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3 - Fisiologia / Bioquimica / Farmacologia
Desenvolvimento e caracterização de lipossomas para a administração controlada de peptídeos terapêuticos
Moraes GS, Zambom CR, Silva GDB, Marin LM, Garrido SS, Ferrari PC, Urban VM, Siqueira WL
Odontologia - UNIVERSIDADE ESTADUAL DE PONTA GROSSA
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse
Este estudo desenvolveu e caracterizou lipossomas para a administração de peptídeos terapêuticos. Três formulações foram preparadas com o método de hidratação do filme lipídico: A (lecitina + colesterol), B (lecitina + ergosterol) e C (dioleoilfosfatidiletanolamina + hemisuccinato de colesterol, pH sensível). Os lipossomas foram caracterizados com ou sem a encapsulação dos peptídeos histatina 5 (Hst 5) e DR9-RR14, obtendo-se ao final nove formulações. O tamanho das partículas, índice de polidispersão (PDI) e potencial Zeta (pZ) foram mensurados pelo método de espalhamento de luz dinâmico. A estabilidade foi avaliada em até 60 dias em 4°C e 25°C. A eficiência de encapsulação (EE) e cinética de liberação em pH fisiológico foram analisadas em HPLC. As formulações C foram submetidas a meio ácido para verificar a liberação dos peptídeos. A morfologia foi analisada por microscopia eletrônica de transmissão. O tamanho dos lipossomas com Hst 5 foi de 96±8 a 147±38 nm, e o dos com DR9-RR14 foi de 110±8 a 129±1 nm. O PDI variou entre 0,2 e 0,6. As formulações C apresentaram pZ de -36±12 a -63±1 mV, enquanto as demais tiveram valores próximos a zero. Os lipossomas mantidos a 4°C se mostraram estáveis por até 15 dias. A EE das amostras com Hst 5 foi de 76±3 a 100%, e com DR9-RR14 foi de 84±2 a 98±0,4%. As formulações C apresentaram liberação somente em pH ácido. Os lipossomas A se mostraram esféricos, os B cilíndricos, e os C heterogêneos. As formulações testadas mostraram características promissoras para o desenvolvimento de novas terapêuticas para o tratamento de doenças e infecções bucais. (Apoio: CAPES N° 001)PN1319 - Painel Aspirante
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3 - Cariologia / Tecido Mineralizado
Análise da concentração de fluoreto em poços artesianos da orla urbana de maceió-al
Jesus WBB, Santos NB, Santos MM, Silva IC, Romão DA, Nóbrega DF
CENTRO DE ESTUDOS SUPERIORES DE MACEIÓ
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse
O aumento do consumo da água potável nas grandes cidades tem levado à exploração indiscriminada de água subterrânea, que pode conter fluoreto de forma natural. A exploração desse recurso é marcada pela informalidade e o monitoramento da concentração de fluoreto nessas águas é uma medida de proteção à saúde humana. O objetivo deste estudo foi avaliar a concentração de fluoreto em águas subterrâneas de bairros da orla urbana do município de Maceió, AL. Por meio de consulta aos órgãos ambientais e busca ativa foram mapeados os poços artesianos de oito bairros da orla urbana da cidade. Amostras de 10ml de água foram coletadas em dois meses consecutivos, em 26 diferentes pontos de coleta, seguindo o Protocolo do Projeto Vigiflúor. A concentração de fluoreto foi determinada em duplicata, por um eletrodo específico para íon flúor acoplado a um potenciômetro. Nas leituras, foi utilizado 1 mL de padrão/amostra + 1 mL de tampão TISAB II, pH 5. Os resultados mostraram uma concentração média (±dp) de 0,249 ± 0,109 ppm F nos 26 poços avaliados, variando de 0,095 ± 0,001 até 0,472 ± 0,043 ppm F. Os valores por bairro variaram entre 0,117 ± 0,031 (Jacarecica) e 0,382 ± 0,068 ppm F (Ponta Verde). Todas as amostras apresentaram menos de 1,5 ppm F, valor máximo de fluoreto na água recomendado pela OMS e considerado crítico para a ocorrência de fluorose esteticamente preocupante. Conclui-se que nas águas subterrâneas de bairros da orla urbana de Maceió há fluoreto natural, em baixas concentrações, não havendo risco de desenvolvimento de fluorose dental com comprometimento estético.PN1322 - Painel Aspirante
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3 - Fisiologia / Bioquimica / Farmacologia
Stemodia maritima, estemodina e os derivados semissintéticos SM-2 e SM-3 reduzem dor inflamatória em ensaio pré-clínico na ATM de ratos
Fernandes MEF, Bezerra MM, Alves MG, Barbosa FG, Mafezoli J, Basílio SR, Pinto VPT, Chaves HV
UNIVERSIDADE FEDERAL DO CEARÁ
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse
O objetivo do presente trabalho é avaliar a eficácia do extrato etanólico da planta Stemodia maritima (ESM), de seu composto isolado estemodina e de seus derivados semissintéticos SM-2 e SM-3 na dor inflamatória induzida na articulação temporomandibular (ATM) de ratos. Para tanto, Ratos Wistar machos (180-240 g) receberam (v.o.) salina, ESM (0,1; 1; 10 µg/kg), estemodina (0,1; 1 μg/kg), SM-2 (1; 10 μg/kg) ou SM-3 (1; 10 μg/kg) 60 minutos antes de os animais receberem uma injeção intra-articular de salina ou formalina (1,5 %) na ATM esquerda (50 µL). Em seguida foi avaliado o comportamento nociceptivo caracterizado pelo ato de levantar a cabeça e coçar região facial, aferido em segundos (s). Para avaliar o envolvimento da via da hemeoxigenase-1 (HO-1), do óxido nítrico (NO) e opioide no mecanismo de ação dos compostos, foram administrados previamente à ESM, estemodina, SM-2 ou SM-3 as drogas ZnPP-IX (i.p.), inibidor da HO-1, aminoguanidina (i.p.), inibidor da enzima NOS, ou naloxona (intratecal), antagonista de receptores opioides. Foi realizada dosagem de IL-1β por ELISA no gânglio trigeminal. Os resultados evidenciaram que ESM, estemodina, SM-2 e SM-3 reduziram (p<0,05) a resposta nociceptiva e a expressão de IL-1β, em relação ao grupo formalina, e seus efeitos não foram revertidos com administração dos antagonistas das vias HO-1, NO e opioide. Observou-se que ESM, estemodina, SM-2 e SM-3 possuem efeito antinociceptivo no modelo de dor inflamatória induzida na ATM de ratos através de redução da citocina IL-1β, agindo independente das vias HO-1, NO e opioide. (Apoio: FUNCAP N° BP3-0139-00228.01.00/18)PN1324 - Painel Aspirante
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3 - Controle de infecção / Microbiologia / Imunologia
Efeito da água ozônizada em biofilmes de Candida albicans - estudo in vitro
Basso S, Vorpagel BEM, Loth EA, Andrade FB, Brandão CG, Baeza LC
Odontologia - UNIVERSIDADE ESTADUAL DO OESTE DO PARANÁ
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse
Um grande desafio da endodontia é a eliminação de microrganismos e seus subprodutos do sistema de canais radiculares. Deste modo, a busca por uma solução irrigadora, que seja capaz de eliminar esses microrganismos e não ser tóxica ao organismo, se faz muito importante. Objetivamos então, avaliar a eficácia da água ozonizada (AO) sobre biofilmes de Candida albicans em alternativa ao hipoclorito de sódio (NaOCl). Foi realizada formação do biofilme em placas de poliestireno de 96 poços, por 48 horas e após este período, aplicados os tratamentos por 30 minutos com AO nas concentrações de 40 e 70 μg/mL e hipoclorito de sódio 2,5%, comparados com grupo controle sem tratamento. Foi realizada quantificação da biomassa por Cristal Violeta (CV), determinação da atividade metabólica do biofilme pelo ensaio de redução do 3, (-4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difenil tetrazolium brometo (MTT) e quantificação por contagem de unidades formadoras de colônias (UFCs). Os resultados obtidos através do método UFC apresentaram uma redução de 84,6%, 63,5% e 99,9% para os tratamentos com AO de 70, 40 μg/mL e NaOCl, respectivamente. Em relação ao CV houve uma redução da biomassa de 70% para AO em ambas as concentrações e de 76,4% para NaOCl. Quanto a atividade metabólica, foi observada uma redução média de 22% para AO (40 e 70 μg/mL) e 6,45% para o NaOCl. Com base em nossos resultados, a AO mostrou efetividade para a redução de C. albicans, embora menor que o NaOCl, sugerindo está ser utilizada como adjuvante no tratamento endodôntico, principalmente em casos de extravasamento apical passível de necrose.PN1325 - Painel Aspirante
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3 - Controle de infecção / Microbiologia / Imunologia
Sucessivas aplicações de Terapia Fotodinâmica aumenta a produção de espécies reativas de oxigênio em Biofilme de Candida albicans
Dias LM, Klein MI, Bellini A, Medeiros KS, Lacerda KT, Pavarina AC
UNIVERSIDADE ESTADUAL PAULISTA - ARARAQUARA
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse
O objetivo desse estudo foi avaliar o efeito de aplicações sucessivas de Terapia Fotodinâmica Antimicrobiana (aPDT) mediada por Photodithazine (PDZ) (25 mg/mL) associada a LED (18 j/cm2- 600 nm) na produção de espécies reativas de oxigênio (ERO) de culturas planctônicas e biofilmes de Candida albicans (ATCC 90028). Biofilmes maduros (48h) e culturas planctônicas de C. albicans foram cultivados em meio de cultura Yeast Nitrogen Base (YNB) para serem ajustados em espectrofotômetro DO540 nm de 1,0 (107 UFC/mL). O protocolo de indução de resistência consistiu em 10 aplicações sucessivas dos tratamentos: aPDT (P+L+), somente PDZ (P+L-), somente luz LED (P-L+) e controle do experimento (P-L-). A Quantificação da produção de ERO foi realizada utilizando a sonda fluorescente Diacetato 2',7' -diclorofluoresceína-H2-DCF-DA na concentração final de 50 mM (n=12). O grupo H2O2 foi adicionado para análise comparativa da produção de ERO. As amostras foram analisadas no Fluorskan Ascent (excitação: 485 nm; emissão: 538 nm). O teste ANOVA-one way com correção de Welch foi aplicado, seguido do pós teste de Games-Howell para comparações múltiplas (p<0,05). Após a 3ª (cultura planctônica) e 7ª aplicação (biofilme), foi observado um aumento na produção de ERO de 683% e 740% do grupo P+L+, respectivamente, em comparação ao controle do experimento. O aumento de ERO após a última aplicação está relacionado ao acúmulo de metabólitos intracelulares. Aplicações sucessivas de aPDT mediada por PDZ promovem maior produção de ERO em Biofilme de C. albicans do que em suspensões planctônicas. (Apoio: FAPs - FAPESP N° 2018/148746-6)