PN0560 - Painel Aspirante
Área: 3 - Fisiologia / Bioquimica / Farmacologia

Apresentação: 09/09 (Quinta-feira) - Horário: 08h30 - 10h00 - Sala: 18

Ação de um nanocarreador de miconazol sobre biofilmes microcosmos salivares
Caldeirão ACM, Araujo HC, Tomasella CM, Sampaio C, Oliveira MJS, Pessan JP, Monteiro DR
UNIVERSIDADE DO OESTE PAULISTA
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

Este estudo avaliou os efeitos de um nanocarreador de miconazol (MCZ) sobre biofilmes microcosmos salivares. O nanocarreador foi preparado através da conjugação de MCZ com nanopartículas de óxido de ferro (NPsOF) cobertas com quitosana (QTS).Para a obtenção do inóculo microbiano final, pool de saliva de dois doadores saudáveis foi suplementado com Candida albicans e Candida glabrata. Os biofilmes foram desenvolvidos por 96 horas sobre discos de vidro posicionados no Amsterdam Active Attachment model. Após, os biofilmes foram expostos por 24 horas ao composto NPsOF-QTS carreando MCZ a 78 (NPsOF-QTS-MCZ78)ou 156 µg/mL (NPsOF-QTS-MCZ156). MCZ a 156 µg/mLfoi utilizado como controle positivo, enquanto o biofilme formado por 120 horas na ausência de drogas foi o controle negativo (CN). A eficácia do nanocarreador foi testada através da contagem de unidades formadoras de colônias (UFCs), composição da matriz extracelular (proteínas, carboidratos e DNA) e ensaio de produção de ácido lático. Os dados foram analisados estatisticamente por ANOVA a um critério e teste de Fisher LSD (α = 0,05). NPsOF-QTS-MCZ156 diferiu estatisticamente dos demais grupos e gerou as maiores reduções nas UFCs de aeróbios e anaeróbios totais, Streptococcus do grupo mutans, Lactobacillus spp.,C. albicans e C. glabrata. NPsOF-QTS-MCZ156 e MCZ reduziram significativamente a produção de ácido lático e aumentaram carboidratos e DNA da matriz extracelular comparados ao CN.
Esses achados reforçam o uso do nanocarreador de MCZ como alternativa efetiva no combate às infecções fúngicas orais.
(Apoio: CAPES  N° 001  |  FAPESP  N° 2017/24416-2)

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PN0561 - Painel Aspirante
Área: 3 - Controle de infecção / Microbiologia / Imunologia

Apresentação: 09/09 (Quinta-feira) - Horário: 08h30 - 10h00 - Sala: 18

A influência da 3' sialolactose e do colostro humano na formação de biofilmes de Candida albicans
Faria JB, Santiago MB, Silva CB, Geraldo-Martins VR, Nogueira RD

Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

O objetivo do estudo foi avaliar in vitro a adesão inicial e a biomassa formada do biofilme de Candida albicans (CA) na presença de colostro (C) com ou sem saliva (S) e 3' Sialolactose (SI). Foram coletadas 30 amostras de colostro e saliva de recém-nascidos de indivíduos com boa saúde geral e bucal após o parto. Os grupos experimentais foram divididos nos que receberam colostro antes (C-A), durante (C-DU) e após 24 horas (C-DE) à aplicação da cultura microbiana. Foi testada a aplicação de saliva apenas (S-A) e em conjunto com colostro (C+S-A) antes da formação do biofilme. Os grupos 3' Sialolactose receberam o oligossacarídeo em duas concentrações antes (SI-A), durante (SI-DU) e após (SI-DE) o inóculo microbiano. Esses grupos foram comparados com biofilmes de 24h (B24h) e 48h (B48h). Os biofilmes foram cultivados em placas de 96 poços por 24h a 37°C. As densidades ópticas foram medidas a 490nm em espectrofotômetro digital. Os biofilmes formados nos grupos CA-SA e CA-C-DE não diferiram dos controles (p <0,05), mas sim quando o colostro foi aplicado após (CA-C-DE) e na presença de saliva (CA-SA), a DO dos biofilmes foi estatisticamente inferior as obtidas nos grupos controle (p<0,05). A aplicação de Sialolactose reduziu a formação de biofilme CA em CA-SI-A e CA-SI-DU (p <0,05).
Conclui-se que o colostro não altera a adesão ou crescimento de Candida albicans, mas a saliva reduz a densidade da biomassa fúngica. A 3' Sialolactose interfere na adesão e no crescimento de ambos os biofilmes, sendo um importante componente do colostro com atividade antimicrobiana.
(Apoio: CAPES  N° 2848/2011)

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PN0562 - Painel Aspirante
Área: 3 - Fisiologia / Bioquimica / Farmacologia

Apresentação: 09/09 (Quinta-feira) - Horário: 08h30 - 10h00 - Sala: 18

Efeito do alendronato de sódio sobre a secreção de metaloproteases 2 e 9 em culturas de fibroblastos gengivais humanos
Marin R, Greco BB, Martinez EF, Teixeira LN
FACULDADE DE ODONTOLOGIA SÃO LEOPOLDO MANDIC
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

O propósito deste estudo foi avaliar o efeito do alendronato de sódio (ALS) sobre a quantificação dos níveis das metaloproteases (MMP) 2 e 9 em culturas de fibroblastos gengivais humanos (FGH). Para isto, FGH foram cultivados em placas de 24 poços, na densidade de 110 células/mm2. Após 24 h, as células foram expostas ao ALS nas concentrações de 0,1µM, 1µM, 5µM e 50µM. Após 24h, 48h e 72h de exposição ao ALS, o meio de cultura foi coletado e os níveis de MMP-2 e 9 foram quantificados por ELISA. Culturas não expostas foram utilizadas como controle. Os dados foram analisados por meio do teste de Kruskal-Wallis, com nível de significância de 5%. Após 24h e 48h, notou-se expressão variável de MMP-2 em FGH expostos ao ALS em diferentes concentrações em relação ao controle (p<0,05). Nestes mesmos períodos não foram identificadas diferenças de expressão de MMP-9 entre os grupos avaliados (p>0,05). Após 72h, todas as concentrações avaliadas promoveram redução na expressão de MMP-2 e MMP-9 em FGH em comparação ao controle (p<0,05).
Estes achados sugerem que a exposição prolongada ao ALS pode reduzir a secreção de MMP por FGH e contribuir para o surgimento de úlceras bucais ou mesmo prejudicar o processo de cicatrização da mucosa oral.

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PN0563 - Painel Aspirante
Área: 3 - Fisiologia / Bioquimica / Farmacologia

Apresentação: 09/09 (Quinta-feira) - Horário: 08h30 - 10h00 - Sala: 18

Influência de duas classes de antidepressivos na osteogênese in vitro
Pereira-Junior NM, Martinez EF, Motta RHL, Ciotti DL, Ramacciato JC
FACULDADE DE ODONTOLOGIA SÃO LEOPOLDO MANDIC
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

A depressão é uma perturbação neurobiológica considerada uma das principais causas de incapacitação no mundo. Dos tratamentos indicados, destacam- se o uso de fármacos antidepressivos tricíclicos (ADTs) e os inibidores seletivos da recaptação de serotonina (ISRS). Estudos anteriores tem associado o uso desses fármacos com um impacto negativo no metabolismo ósseo. O objetivo deste estudo in vitro foi avaliar a influência de ADTs e ISRS sobre o metabolismo ósseo. Foram utilizadas uma linhagem de células osteoblásticas humanas (SaOS-2) suplementadas com doses dos fármacos variando entre 10 a 30 µM. Como controle, as células foram mantidas apenas em meio basal. Após 24, 48 e 72 h, avaliou-se a proliferação e viabilidade celular pelos ensaios de Azul de Trypan e MTT. Adicionalmente, os níveis de transcritos de marcadores da diferenciação osteoblástica como osteocalcina (OC), sialoproteína óssea (BSP) e colágeno (COL), foram avaliados por qPCR. Os dados foram tabulados e submetidos à análise estatística, tendo sido adotado nível de significância de 5%. Para ambos os fármacos, os resultados revelaram uma redução da proliferação e da viabilidade celular de forma dose-dependente (p<0,05), bem como uma redução significativa da expressão gênica de OC, BSP e COL (p<0,05).
Os resultados indicam que os fármacos estudados podem impactar negativamente o metabolismo ósseo e comprometer o sucesso dos procedimentos clínicos que envolvam regeneração óssea.

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PN0564 - Painel Aspirante
Área: 3 - Controle de infecção / Microbiologia / Imunologia

Apresentação: 09/09 (Quinta-feira) - Horário: 08h30 - 10h00 - Sala: 18

Estudo comparativo de tecnologias laboratorias para avaliaçao de viabilidade celular in vitro
Rahhal JG, Ruy GP, Sipert CR
Dentística - UNIVERSIDADE DE SÃO PAULO - SÃO PAULO
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

A viabilidade celular pode ser definida como o número de células saudáveis em uma amostra e apresenta papel fundamental principalmente nos experimentos que envolvem a avaliação da citotoxicidade de um material. Esse trabalho comparou o método MTT com o de exclusão por Azul de Trypan para avaliação da viabilidade de células da papila apical (CPA) in vitro quando em contato com hidróxido de cálcio (HC). Em um dos ensaios realizados, CPA foi tratada com HC a 1000 e 250 µg/mL por 5 dias. Em outro ensaio, CPA foi mantida em meio α-MEM acrescido de Soro Bovino Fetal (SBF) na concentração de 0,5% e 15% por 1, 3, 7 e 14 dias. A viabilidade celular foi avaliada por MTT e Azul de Trypan. No primeiro experimento, a análise foi feita por Kruskal-Wallis para os dados obtidos por MTT e ANOVA para a contagem celular. No segundo experimento, ANOVA para ambos os métodos. Os dados do MTT no primeiro ensaio não demonstraram diferenças estatísticas significativas entre as concentrações de HC testadas, enquanto que por meio da contagem de células viáveis houve aumento significativo de citotoxicidade proporcionalmente à concentração de HC. No segundo ensaio, houve diferença estatística significativa quanto aos dados de viabilidade celular entre as concentrações 0,5% e 15% de SBF com aumento da população celular de forma proporcional à concentração de SBF demonstrada de forma similar por ambos os métodos.
O uso isolado do método MTT para estudos de viabilidade pode não demonstrar acurácia para a avaliação da citotoxicidade de determinados materiais odontológicos como o hidróxido de cálcio.
(Apoio: CNPq  |  FAPs - FAPESP  |  CAPES)

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PN0566 - Painel Aspirante
Área: 3 - Fisiologia / Bioquimica / Farmacologia

Apresentação: 09/09 (Quinta-feira) - Horário: 08h30 - 10h00 - Sala: 18

Cinamoiloxi-mammeisina isolada da geoprópolis brasileira inibe a diferenciação de linfócitos Th17 humanos
Breseghello I, Prado DS, Sberci WAP, Gonzaga VR, Mariano RC, Alencar SM, Rosalen PL, Franchin M
UNIVERSIDADE ESTADUAL PAULISTA - ARAÇATUBA
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

O presente estudo teve como objetivo avaliar a atividade do cinamoiloxi-mammeisina (CNM), uma 4-fenil cumarina isolada de uma geoprópolis brasileira na diferenciação dos linfócitos Th17 humanos. A geoprópolis de Melipona scutellaris foi obtida na cidade de Entre Rios (lat. º22 'S, long. 37º54' W), estado da Bahia, Brasil. O isolamento do composto CNM foi realizado por CLAE-FR. As células mononucleares do sangue periférico foram obtidas de indivíduo saudável (CAAE 12616119.5.0000.5418 - aprovado em 11/08/2019), separadas por gradiente de Percoll e estimuladas com IL-1β, IL-21, IL-23, TGF-β e IL-6 por 5 dias. A leitura dos linfócitos diferenciados foi realizada em um citômetro de fluxo FACSVerse. A análise estatística foi realizada utilizando ANOVA seguido do teste Tukey (p < 0.05). De acordo com os resultados, foi verificado que o tratamento com CNM a 10µM reduziu a diferenciação dos linfócitos Th17 humanos, quando comparado ao grupo que recebeu o veículo de dissolução do composto (p<0,05).
Os dados obtidos neste estudo, confirmam os resultados constatados em camundongos e, portanto, demonstra a atividade promissora do composto CNM em atuar no controle de doenças inflamatórias dependentes de linfócitos Th17.
(Apoio: CNPq  N° 130365/2021-1  |  FAPESP  N° 2016/15563-9)

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PN0567 - Painel Aspirante
Área: 3 - Controle de infecção / Microbiologia / Imunologia

Apresentação: 09/09 (Quinta-feira) - Horário: 08h30 - 10h00 - Sala: 18

Influência de subprodutos de Streptococcus oralis no desenvolvimento de biofilmes de Candida albicans
Martorano-Fernandes L, Ricomini-Filho AP, Cury AAB
Faculdade de Odontologia de Piracicaba - FACULDADE DE ODONTOLOGIA DE PIRACICABA
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

A interação entre Candida albicans e Streptococcus oralis pode ocorrer por contato célula-célula ou liberação de produtos metabólicos (ex: quorum sensing). Apesar da relação por contato celular estar bem estabelecida, o papel do quorum-sensing na interação entre esses microrganismos ainda é pouco explorado. Diante disso, este estudo, in vitro, objetivou avaliar a influência de produtos metabólicos de S. oralis no desenvolvimento de biofilme de C. albicans. Para isso, culturas de C. albicans e S. oralis foram ajustadas, respectivamente, para as densidades ópticas (600nm) de 10⁵ e 10⁷ UFC/mL. Em seguida, o sobrenadante de culturas de S. oralis (16h) foi filtrado a fim de obter os produtos metabólicos bacterianos. Então, biofilmes de C. albicans; C. albicans + S. oralis; C. albicans + sobrenadante; e S. oralis foram desenvolvidos sobre discos de resina acrílica pré-condicionados com saliva humana clarificada. Após esse período, os biofilmes foram analisados quanto ao metabolismo celular, contagem de unidades formadoras de colônia (UFC) e peso seco. Os dados foram submetidos à análise de variância a um critério e post-hoc de Tukey (α = 0,05). Como resultado observou-se que biofilmes de C. albicans + sobrenadante apresentaram maior metabolismo celular do que biofilmes de C. albicans, e de C. albicans + S. oralis (p < 0,05). Apesar disso, o sobrenadante não contribuiu para o aumento da contagem de UFC e da biomassa do biofilme fúngico (p > 0,05).
Portanto, os produtos metabólitos de S. oralis parecem não contribuir para o desenvolvimento do biofilme de C. albicans.
(Apoio: CAPES  N° 001)

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PN0565 - Painel Efetivo
Área: 3 - Controle de infecção / Microbiologia / Imunologia

Apresentação: 09/09 (Quinta-feira) - Horário: 08h30 - 10h00 - Sala: 18

Efeito antimicrobiano da terapia fotodinâmica com fotosensibilizador incorporado ao silicone do tubo orotraqueal
Delgado MGT, Segundo ASG
Centro de Pós-graduação - FACULDADE DE ODONTOLOGIA SÃO LEOPOLDO MANDIC
Conflito de interesse: Não há conflito de interesse

Pseudomonas aerunginosas e Candiada albicans estão associados a infecções, objetivou-se avaliar do efeito antimicrobiano da terapia fotodinâmica (PDT) quando o fotossensibilizador (FS) é incorporado ao silicone dos tubos orotraqueais. Foram 126 amostras: 60 para C. albicans e 60 com P. aerunginosas e 6 para análise de espectroscopia. Divididos em: Grupo controle A1, A2 sem PDT; Grupo B1; B2 foram imersas em azul de metileno (AM) 100 µM por 24hs; Grupos C1 e C2 imersos em AM com concentração de 300 µM por 24hs. Grupos D1; D2, não receberam AM prévio, somente após o crescimento do biofilme realizou-se PDT. Os grupos B1,2 e C1,2 após o FS foram irradiados a cada 48 hs com LED, 100 mW e 12J/cm², por 2 minutos. O grupo D1 e 2 com AM a 100µM e foi irradiado com o LED por 2 minutos. A redução bacteriana foi significativa todos os grupos quando comparado ao controle, sendo maior nos grupos D1 e 2 (PDT), 3 log de redução e apenas 1log nos grupos com FS incorporado. Os grupos com concentração de 300 µM apresentou maior absorbância conforme a espectroscopia. Nas condições do estudo, a incorporação do FS ao tubo orotraqueal é uma alternativa viável para o controle microbiano, entretanto os maiores efeitos foram obtidos pelo método de PDT.
O efeito da aPDT foi evidenciado na Pseudômonas aeruginosa. O tempo, e o momento de ação antimicrobiana observado nos grupos D1, D2 foram requisitos na metodologia e com resultados positivos. A incorporação do AM em 100uM não foi efetiva na superfície do biomaterial, porém houve mudança óptica na transmitância de luz entre o grupo controle (A1) e o grupo (C1) com 300uM.

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